方法脂质体方法行瞬时转染,CCK-8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞凋亡率;实时定量PC

方法脂质体方法行瞬时转染,CCK-8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞凋亡率;实时定量PCR(qRT-PCR)分析miR-214-3p及EGR1表达;蛋白质印迹法检测细胞EGR1及着色性干皮病基因(XPD)蛋白表达。结果人卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008中miR-214-许多3p表达高于人卵巢癌顺铂耐药细胞C13K (P<0.001)。转染48 h,miR-214-3p在OV2008 inhibitor组细胞(0.11±0.09)、C13K mimics组细胞(22.42±4.27),与OV2008空白对照组细胞(7.92±2.22)及C13K空白对照组Ralimetinib供应商细胞(0.33±0.16)比较,差异有统计学意义(P<0.001);C13K mimics组细胞增殖减慢,细胞凋亡上升,细胞对顺铂敏感性增加,OV2008 inhibitor组细胞增殖加快,细胞凋亡下降,对顺铂敏感性降低(P<0.01);miR-214-3p上调后EGR1在mRNA及鑾锋倝鏇村蛋白水平表达升高,XPD蛋白降低;miR-214-3p下调使EGR1在mRNA及蛋白水平表达降低,XPD蛋白升高。结论 miR-214-3p与卵巢癌细胞顺铂耐药有关,EGR1蛋白可能是miR-214-3p的下游靶点。
目的探究恶性实体肿瘤患者淋巴细胞亚群及CD4~+T细胞、CD8~+T细胞上免疫检查点分子PD-1、LAG-3、TIM-3的表达情况。

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