最终阐明RBM4可作为胃癌新的分子靶点,用于胃癌的分子靶向治疗。方法1、观察RBM4在胃癌及胃良性病变组织中的表达,并分析RBM4

最终阐明RBM4可作为胃癌新的分子靶点,用于胃癌的分子靶向治疗。方法1、观察RBM4在胃癌及胃良性病变组织中的表达,并分析RBM4表达与临床病理因素及预后之间的关系。实验方法如下①免疫组化检测胃组织芯片(tissue microarray,TMA)中RBM4蛋白表达;②qRT-PCR检测25例新鲜FK866小鼠术后胃癌组织及癌旁组织标本中RBM4 mRNA表达。2、体内外实验观察RBM4对胃癌增殖、凋亡、迁移及侵袭等恶性生物学行为的影响。利用RBM4过表达慢病毒载体及靶向沉默RBM4载体,进行如下实验①采用Western Blot、流式细胞术观察RBM4在胃癌细胞中的表达,筛选购买Idasanutlin出RBM4低表达及高表达胃癌细胞株各一株;②CCK-8增殖实验观察RBM4对胃癌细胞增殖的影响;③流式细胞术观察RBM4对胃癌细胞凋亡的影响;④划痕实验与transwell小室迁移实验观察RBM4对胃癌细胞迁移的影响;⑤transwell小室侵袭实验观察RBM4对胃癌细胞MLN8237分子量侵袭的影响;⑥体内实验观察RBM4对胃癌皮下移植瘤生长的影响。3、研究RBM4对胃癌恶性生物学行为影响的分子机制。实验方法如下①免疫组化检测胃癌皮下移植瘤组织中p53和Bcl-2蛋白的表达;②Western Blot研究RBM4对胃癌细胞丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)通路蛋白表达的影响。

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