此外收集同期新鲜手术切除12例胃癌和配对癌旁组织(non-tumor)。收集记录患者姓名、性别、年龄、家族史、病理报告、手术记录等临床资料。2.采用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测正常胃黏膜和胃癌组织切片中Vinculin的表达情况。我们采用半定量计分方法,将细胞染色强度和染色细胞所占的比例得分两者相加来判定PCI-32765购买Vinculin的表达情况。荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测新鲜组织中Vinculin在胃癌和癌旁组织的表达情况。收集患者术后3年病历资料,记录术后生存时间,制作生存分析曲线。二、体外实验研究Vinculin在胃癌细胞系中Selleckchem MEK162的表达情况及功能。1.采用qRT-PCR及Western blot方法检测Vinculin在BGC-823、SGC-7901、HGC-27三种胃癌细胞系及正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达水平。2.采用si-RNA瞬时转染技术,在SGC-7901和BGC-823细胞中分别沉默Vinculin后,分别应用3-(4,5-二selleck screening library甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法、流式细胞术和划痕实验对细胞增殖活力、凋亡率和迁移能力进行检测。3.在转染si-RNA沉默胃癌细胞中Vinculin的表达后,利用Western blot检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1和p21、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达以及迁移相关蛋白基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2和9的表达。