宫颈癌组织中gsk3β、p-gsk3βser9和p-gsk3βtyr216表达阳性率分别为18.8%、68.8%和12.5%。早期宫颈癌患者中gsk3β和p-gsk3βtyr216表达显著高于中晚期宫颈癌患者(25.5%vs.4.0%,χ2=5.193,p=0.029;76.4%vs.52.0%,χ2=4.749,p=0.039),早期宫颈癌患者中p-gsk3βser9表达显著低于中晚期宫颈癌患者(5.5%vs.28.0%,χ2=7.988,p=0.009)。在宫颈癌组织中随着细胞学分级的降低,p-gsk3βser9阳性率也随之升高(7.4%、7.9%和33.3%,χ2=7.329,p=0.031)。淋巴结转移阳性的宫颈癌患者中gsk3β和p-gsk3βtyr216表达均显著低于淋巴结转移阴性的宫颈癌患者(5.9%vs.28.3%,χ2=6.427,p=0.018;52.9%vs.80.4%,χ2=6.878,p=0.014),p-GSK3βser9在淋巴结转移阳性的宫颈癌患者中表达显著高于淋巴结转移阴性的宫颈癌患者(23.5%vs.4.3%,χ2=6.577,p=0.015)。HPV阳性表达与GSK3β阳性表达呈负相关(相关系数R=-0.392,p=0.001),与p-GSK3βtyr216阳性表达呈正相关(相关系数R=0.275,p=0.026),与p-GSK3βser9阳性表达无相关性。2.HPV

为什么 E7可显著增加宫颈鳞癌C33A细胞S期比例,提示HPV E7可促进宫颈癌细胞DNA的复制,从而导致肿瘤细胞的恶性转化。HPV E6、E7过表达可显著增强C33A细胞侵袭迁移能力及增殖能力,并且HPV 许多 E6、E7两者之间有协同作用。3.HPV E6、E7在较短时间(24h内)可通过GSK3β蛋白磷酸化激活,HPV E6、E7联合对于激活GSK3β蛋白磷酸化具有协同作用。HPV E6、E7通过激活GSK3β蛋白磷酸化发挥对GSK3β下游靶基因CyclinD1、β-catenin基因的调控作用。综上所述,我们初步证实:HPV E6、E7通过激活GSK3β蛋白磷酸化发挥对GSK3β下游靶基因CyclinD1、β-catenin基因的调控作用,从而促进了宫颈癌细胞的侵袭、迁移、增殖能力,导致恶性生物学行为。
目的乳腺癌是严重威胁妇女身心健康的恶性肿瘤之一,其发病率在国内呈逐年上升趋势,虽然近年来针对乳腺癌发病分子水平的研究比较深入,发现了多种因子及信号通路参与了乳腺癌的发生发展,但其发病机制仍然不清楚,针对乳腺癌相关分子的研究,仍是当前研究的重要课题。葡萄糖调节蛋白94(glucose

regulated protein, GRP94),是主要贮存于内质网的分子伴侣,与HSP90有50%的同源性,参与内质网应激反应,同时也是未折叠蛋白反应下游关键分子,研究发现GRP94在结肠癌,胰腺癌,食管癌,乳腺癌等多种肿瘤中高表达,且参与了肿瘤的发生与发展,而其相关机制的研究是当前的热点之一。本课题在细胞水平检测了GRP94在乳腺癌细胞中的表达,同时在乳腺癌MCF7细胞中采用RNAi技术靶向下调GRP94表达,观察沉默GRP94对乳腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响并探讨其可能机制,有助于发现GRP94与乳腺癌发生发展之间的关系,为寻找新的乳腺癌治疗靶点、乳腺癌的预防与治疗提供理论依据。Wnt/β-catenin信号通路的众多成员都参与了乳腺癌的发生与发展过程,研究发现Wnt信号在乳腺癌中异常活跃,且协同TGFp信号通路参与调节肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移等重要过程,本研究通过沉默GRP94表达,进一步探讨GRP94与Wnt/β-catenin信号通路之间的联系,进而阐释GRP94在乳腺癌发生发展过程中的重要作用。方法1.

Real-time PCR、Western blot分别在mRNA与蛋白水平检测GRP94在乳腺上皮细胞MCF10A、乳腺癌MCF7、MDA-MB-231、BT474及SK-BR-3细胞株中的表达。2.采用RNAi靶向沉默技术,在乳腺癌MCF7细胞株中沉默GRP94基因表达,观察其对MCF7细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响,并通过Western PLX3397体外 blot分别检测相关分子的表达。3.Western blot检测Wnt/p-catenin信号通路关键分子及相关靶基因的表达。结果1.GRP94在乳腺癌细胞中表达显著增高,且在MCF7细胞中表达最高(P
丝素蛋白(SF)是一种综合性能优良的天然生物材料,通过电纺技术将SF制备成超细纤维实现对天然细胞外基质(ECM)的超微结构仿生是当前骨组织工程(BTE)研究领域的热点之一。电纺SF纤维结合具有再生特性的干细胞将有利于提高BTE方法修复骨缺损的再生功效,这需要提高支架的成骨诱导分化性能。Purmorphamine(PM)是一种新型的嘌呤衍生类小分子药物,具有优良的骨生成诱导活性。本论文主要目的是基于电纺SF仿生纤维,探讨引入PM后SF基纤维的成骨诱导分化功效。为了检测SF本身是否具有成骨诱导能力,本研究首先采用Na2CO3脱胶法从蚕茧中提取SF以及全骨髓贴壁法从大鼠体内提取骨髓间充质干细胞(BMSCs),并对提取的SF和BMSCs进行分析鉴定,然后配制含不同SF浓度(0.01%、0.05%和0.1%)的培养基并对BMSCs进行培养,体外检测这些SF溶液对BMSCs生长、增殖和成骨分化的影响。结果表明:1)蚕茧提取样品的FTIR光谱图在1653、1530.5和1212.