天然小分子化合物鹅不食草有效成分6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)对肺癌细胞的作用,及对表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor, EGFR)印制剂吉非替尼的增效作用。吉非替尼(Gefitinib)是1990年发现的一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal

growth factor receptor inhibitor, EGFR-TKI),之后的研究发现吉非替尼具有抑制肺癌细胞的生长、转移和血管生成,并且有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,适用于治疗以前接受过化学治疗的局部晚期以及转移性非小细胞性肺癌。基于现有的临床研究结果,吉非替尼对于那些适用的病例有很好的治疗效果,然而因为吉非替尼是激酶抑制剂的原因,所以长时间使用极其容易产生抗药性以及副作用,因此在使用吉非替尼的时候经常需要停药很长时间或者和其他药物一起使用。6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)是从鹅不食草中提取的一种倍半萜类小分子化合物,研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用。实验室的前期研究发现6-OAP靶向SCF复合物诱导细胞周期G2/M期阻滞的分子机理,并且具有适应的药代动力学特征。进一步我们发现6-OAP对多种肺癌细胞系具有抑制作用,并且在小鼠模型上也具有显著的抗癌效果,前期研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用,并且可以增加地塞米松对骨髓瘤的敏感性。因此,我们探索了6-OAP与吉非替尼联合使用是否会克服吉非替尼的耐药性。吉非替尼是表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂,抑制其下游信号通路,6-OAP通过作用于SCF复合物也作用众多的细胞通路,通过对比发现6-OAP与吉非替尼的联合用药比两药单独使用有更好抑制细胞增殖的效果,使用软件计算协同指数。因此我们选用肺腺癌细胞系A549细胞作为我们研究的主要对象,发现6-OAP与吉非替尼的联合使用可以明显的抑制晓得侵袭转移的能力,并且有明显的统计学意义,进一步研究发现6-OAP联合吉非替尼可以明显下调p-AKT、p-ERK等蛋白的水平,增强吉非替尼的抗肺癌作用,为吉非替尼耐药的病人提供了新的治疗可能,为中医药联合西药治疗癌症增加了可能。2.西药治疗疾病的优势是作用机制比较清楚,针对的病症也比较清楚,而中医药的优势在于经过数千年的传承,对于治疗疾病有着自己一整套的完整体系,而具体的作用机制不清楚,这阻碍了中医药在全世界范围内的认可。因此筛取中药中的有效成分是刻不容缓,实验室中拥有众多中药提取物,我们使用多种癌症细胞用来筛取中药中可以抗击癌症细胞系的提取物。我们发现多种抗击癌症的活性成分,Evo是我们近期发现的一个新的天然小分子化合物,初步的研究发现Evo能抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞在G2/M期阻滞,后续的研究正在进行中。
沙门菌是一种革兰氏阴性兼性细胞内的细菌病原体,具有广泛的宿主谱,在全球范围内感染病例中均表现出有较高的发病率和死亡率。沙门菌的致病性主要依赖于其侵袭细胞及在细胞内生存的能力。而这又依赖于其两个毒力岛SPI-1及SPI-2编码的两个III型分泌系统(T3SS)。T3SS具有分泌和转导多种细菌毒力因子进入宿主细胞的功能。Sop Selleck GDC0449 LDN-193189 B是SPI-1重要的分泌毒力因子,具有肌醇磷酸酶活性,在沙门菌侵入过程中可诱导多种磷酸肌醇的去磷酸化作用。Sop

B已经被证明在侵染过程中影响多种细胞通路,包括细胞膜褶皱形成及抑制SCV与溶酶体的融合等。目前,对于Sop B功能的研究主要关注于其在沙门菌侵染及胞内存活过程中的作用。虽然有研究表明Sop B能够影响多种对炎性反应有调控作用的细胞信号通路,但Sop B是否影响炎性反应的报道仍不多见。炎性体是天然免疫系统的重要组成部分。炎性体是一种多蛋白复合体,在感染或应激条件下,促进促炎细胞因子成熟释放。炎性体组成包括:受体,接头蛋白及效应因子caspase-1。PRRs,包括NLR家族及ALR家族等都能启动炎性体的组装。活化的NLR或ALR促进ASC的聚集,而ASC的聚集招募caspase-1进入ASC斑点,启动caspase-1的自溶性活化,从而诱导的IL-1β及IL-18的蛋白水解过程。作为宿主重要的防御机制,炎性体的活化受到多种因素的严格调控,例如:受体的自抑制及修饰作用。病原同样可以利用毒力因子抑制炎性体功能,从而达到免疫逃逸的目的。既然,Sop B蛋白在沙门菌侵染及维持胞内存活都具有重要的作用,其是否影响沙门菌诱导的炎性体活化。因此,本研究利用λRed重组系统对沙门菌SL1344进行Sop NLG919半抑制浓度 B编码基因的敲除,并以低拷贝的p STV28为表达载体分别构建了全长sop B基因回补质粒及sop B突变回补质粒。随后,将回补质粒电转至△Sop B菌株中,由此成功获得三株重组菌株,包括△Sop B::Vect,△Sop B::Sop B及△Sop B::C460S。炎性体活化试验中,为了探究Sop B蛋白是否影响沙门菌诱导的炎性体。应用ELISA方法检测Sop B对沙门菌诱导的IL-1β进行测定,LDH的释放分析细胞死亡,并应用Western

blot分析caspase-1、IL-1β、AKT的活化情况及ASC寡聚化水平。免疫荧光分析ASC斑点形成水平等。结果显示沙门菌毒力因子Sop B通过诱导AKT信号活化显著抑制沙门菌诱导的炎性体活化。
研究背景:乳腺癌是目前中国女性最常见的恶性肿瘤,也是全世界肿瘤致死的首要原因。三阴性乳腺癌是指免疫组织化学染色显示雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2均为阴性的一种特殊的乳腺癌。三阴性乳腺癌约占乳腺癌的12-17%,比非三阴性乳腺癌的侵袭性更强、复发转移更早,在转移性乳腺癌中生存率更低,预后更差。此外,由于三阴性乳腺癌对内分泌治无反应,目前治疗主要以手术为主,辅以全身性化疗,但该肿瘤异质性大,临床预后差,寻找有效的分子指标和治疗靶点已迫在眉睫。LETM1蛋白是一种在人类及酵母中都较为保守的线粒体内膜蛋白,它能减少线粒体的生成及ATP的产生。其表达水平的异常能诱发线粒体功能的紊乱,从而导致包括肿瘤等人类多种疾病的发生。在人类众多恶性肿瘤中都发现LETM1蛋白表达水平显著升高,但是LETM1过表达在三阴性乳腺癌中的临床病理特点和预后意义仍不清楚。本研究旨在探讨LETM1蛋白过表达在三阴性乳腺癌中的临床预后评估意义。材料与方法:选取组织标本共214例,其中包括107例三阴性乳腺癌,42例导管内原位癌,65例癌旁正常组织。首先,应用细胞免疫荧光染色检测方法分析LETM1蛋白在MCF-7乳腺癌细胞中的定位情况。然后采用免疫蛋白印迹方法在三阴性乳腺癌组织中对LETM1蛋白进行相对定量,验证LETM1蛋白在三阴性乳腺癌中是否存在过表达。最后,采用免疫组织化学方法检测LETM1蛋白在三阴性乳腺癌、导管内原位癌及正常组织中的表达情况,并分析其蛋白表达在三阴性乳腺癌中的临床病理意义。结果:1.