方法:MTT法检测不同浓度曲古抑菌素A(TSA)和联合GSK-3β抑制剂SB216763对A549细胞增殖的影响;Western Blot法检测各组细胞中GSK-3β和磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)蛋白表达的变化;流式细胞仪分析细胞周期;免疫细胞化学法检测p27蛋白水平。结果:TSA以剂量依赖性抑制A549细胞生长,使细胞周期阻滞于G0/G1期,用SB216763预处理后明显减弱Selleck Proteasome 抑制剂了TSA对A549细胞的生长抑制作用和细胞周期阻滞。TSA对细胞GSK-3β蛋白表达无明显影响,却降低了pGSK-3β蛋白水平,p27蛋白表达增加;抑制剂SB216763使pGSK-3β表达增加,下调p27蛋白水平。结论:GSK-3β参与并促进了TSA对肺癌细胞的生长抑制和细胞周期阻滞效应,其机制可能与GSK-3β对p27蛋白的调节有关。”
“目的研究离体肝一般脏缺血再灌注早期丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信号转导途径对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA和细胞间黏附分子-1(inter-cellular adhesion molecule1,ICAM1)mRNA表达的影响。方法建立兔离体肝脏缺血很少再灌注模型,对照组(n=12):灌注液中不加特异性p38MAPK抑制剂SB202190;抑制组(n=12):灌注液中加入SB202190(浓度3μmol/L)。分别于肝脏离体前,冷保存末,再灌注10、30、60及120min时获取肝组织标本。分别应用Western blot法及免疫沉淀法检测肝组织中p38MAPK蛋白的表达及活性;RT-PCR法检测肝组织中TNF-α mRNA的表达水平,原位杂交法检测肝组织中ICAM1 mRNA的表达水平。