-)的浓度、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)和NADPH氧化酶的活性。RT-PCR法检测细胞eNOS和NADPH氧化酶p22phox的mRNA表达。 结果:细胞流式仪发现体外分离培养的细胞高表达CD34,免疫组化法进一步发现该类细胞还可表达内皮系特异标志vWF;同时该类细胞也能摄取ac-LDL和结合UEA-1,提示本实验已成功分离和体外培养出兔外周血EPCs。与正常组相比,高胆固醇血症组兔EPCs的数量( 30.43±1.76 vs 50.18±6.83)/ (视野×200) (P0.05),但有增加的趋势。

4.1μM阿托伐他汀和1μM罗格列酮均可分别使高胆固醇血症组eNOS表达增加60%和23%。两者联合干预则使表达增加94%,较单药增加更为明显(P0.05)。1μM阿托伐他汀和1μM罗格列酮分别干预后均使NADPHp22phox mRNA表达下降(P<0.05),联合干预后则进一步下降,但仍高于正常组(P0.05),而且1μM阿托伐他汀组不影响其表达(P>0.05)。1μM罗格列酮及1μM罗格列酮和1μM阿托伐他汀联合用药组较高胆固醇血症和正常组高(P0.05)。罗格列酮联合阿托伐他汀组TC和LDL较损伤未干预组和罗格列酮组显著降低(P0.05),其对TG、HDL和血糖也无影响。 selleck抑制剂 2.损伤未干预组的EPCs数量较正常组降低了40%;罗格列酮组和阿托伐他汀组均使EPCs数量升高,分别增加了57%和65%,且与正常组无差异(P>0.05);药物联合组则使EPCs数量进一步提高,增加了1倍(P0.05)。

5.与正常组相比,未损伤干预组α-SMA表达显著增加;罗格列酮组和阿托伐他汀组均分别使α-SMA表达下降,而药物联合干预组则使α-SMA进一步下降。 6.损伤未干预组较正常组血清NO水平降低83%(P<0.05),罗格列酮组和阿托伐他汀组NO水平分别较损伤未干预组升高了30%和38%,罗格列酮联合阿托伐他汀组使NO进一步升高了62%,但仍低于正常组水平(P<0.05)。损伤未干预组抗超氧阴离子(O2.-)能力较正常组下降了约1.7倍;罗格列酮使其抗O2.-能力提高了1倍(P<0.05);阿托伐他汀组则提高了87%(P<0.05);两药联合提高了1.5倍(P<0.05);罗格列酮组和阿托伐他汀组均分别使损伤未干预组eNOS的mRNA表达上调(P<0.05),罗格列酮组和阿托伐他汀组均使损伤未干预组表达下降(P
目的:1.体内和体外建立表皮细胞去分化模型,检测与去分化有关的信号通路,确定调控该过程的关键蛋白,为进一步探明表皮细胞去分化发生机制提供理论基础;2.体外诱导骨髓间充质干细胞向汗腺细胞分化,并利用干细胞移植技术促进体内损伤汗腺的修复与再生。 Dolutegravir分子量 方法:1.将去除基底干细胞层的人表皮片移植到全层皮肤切割伤BALB/c裸鼠皮下,分别于移植后3d、5d和7d取出移植皮片,采用免疫组织化学法、流式细胞检测、Western

bloting和RT-PCR法检测移植皮片表型的改变。同样方法处理瘢痕皮片和角膜上皮,通过免疫组织化学染色观察二者表型的改变。2.离体条件下选择热和bFGF作为诱导因素处理成熟表皮细胞。采用细胞化学染色、流式细胞检测和Western bloting观察细胞表型的改变;通过Giemsa染色和电镜检测观察细胞形态的改变;通过二维和滋养层培养体系观察细胞的增殖能力,包括克隆形成和复层生长情况;采用器官培养体系体外构建三维皮肤观察细胞再分化形成表皮情况;应用基因芯片技术观察细胞基因表达的改变。用β-粘连蛋白(β-catenin)激动剂处理细胞观察细胞表型和增殖能力的改变;通过siRNA抑制β-catenin的表达观察其对表皮细胞去分化过程的影响;利用Smad4敲除小鼠间接激活表皮细胞β-catenin,并观察CK14和Ki67在表皮组织内的表达情况。3.体外分离、培养和鉴定人成体骨髓间充质干细胞(MSCs)和人汗腺细胞(SGCs);分别用BrdU或绿色荧光蛋白(green 很少 fluorescence protein,GFP)标记MSCs;将融合的SGCs经47℃高温处理造成体外热损伤休克模型,再加入标记的MSCs共同培养,5d后,检测MSCs表型的改变;将具有汗腺表型的干细胞局部移植于裸鼠烫伤脚掌观察汗腺组织再生修复情况,结合碘.淀粉发汗实验检测汗腺功能以判定治疗效果;选择一例烧伤自愿患者,该患者双上臂背侧均有相似的瘢痕,经发汗实验证明无汗液分泌。经伦理委员会批准和知情同意条件下,抽取其骨髓和切取小块正常皮肤分离培养骨髓间充质干细胞和汗腺细胞进行共培养,诱导骨髓间充质干细胞获得汗腺细胞表型,通过自行设计的方案将该细胞种植于右侧切除瘢痕处。创面愈合后实验侧行发汗实验、汗液成份分析以及组织学检查。 结果:1.去基底细胞层处理的表皮片干细胞标志物CK19和β1整合素染色阴性;移植后5d,存活皮片CK19和β1整合素染色呈多层分布,而不是正常表皮中的单层分布。流式细胞仪检测结果显示,表皮片移植后CK19阳性细胞和β1整合素阳性细胞分别由移植前的0.00%和0.00%增加到7.54%和5.24%,而CK10阳性细胞由99.62%下降为86.