结果 经软件分析得出新型LL-37杂合肽为水脂两亲性的阳离子多肽,可靶向性地抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖(P<0.05),其IC50值为58.34μmol/L,而对正常乳腺MCF10A细胞无明显抑制作用;新型LL-37杂合肽与MCF-7细胞具有较高的亲和力,可引起细胞周期阻滞于S期及显著增加细胞早期凋亡率(P<0.01);但在加Z-VAD-FMK体外入caspase抑制剂后,细胞周期阻滞及凋亡情况明显缓解(P<0.01)。结论
目的观察抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)表达对MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌功能及细胞增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法将培养好的MIN6细胞分为3组,观察组转染siRNA-CDK8慢病毒液(可抑制细胞CDK8IACS-10759说明书表达),空白组不给予任何干预,对照组转染siRNA-NC慢病毒液(阴性对照),培养48 h。CCK-8检测各组细胞增殖活性(OD值),流式细胞术观察各组细胞周期分布,ELISA法检测各组细胞上清液胰岛素,荧光定量PCR法检测各组细胞CDK8、胰岛素合成相关转录因子(PDX1、INS2和MAFA)、胰岛素转什么运相关因子GLUT2mRNA,Western blotting检测各组细胞CDK8、细胞周期蛋白(Cyclin)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)、增殖细胞核抗原(PCNA)。结果与对照组及空白组比较,观察组细胞OD值降低,G_0/G_1、S期细胞比例增加,细胞上清液胰岛素水平降低,CDK8、PDX1、INS、MAFA、GLUT2 mRNA相对表达量降低(P均<0.05)。