结果表明,该方法能够在39℃等温条件下,20 min内实现对胞内劳森菌的有效检测;所建立的方法特异性强,仅对L.intracellularis产生特异性扩增,对其他常见引起猪腹泻的病原均无扩增;灵敏性高,以L.intracellularis基因组DNA为模板,检出限为1.4×10~2fg/μL;在60份临床样品中,该方法对L.intracellularPanobinostatis的检出率为66.7%(40/60),同real-time LAMP和real-time PCR方法一致。本研究所建立的real-time RPA方法反应快速、特异性强、灵敏性高,可用于猪场胞内劳森菌的快速检测。
食用香辛料种类繁多，市场上以次充好、以假乱真的现象时有发生。DNA提取对基于DNA技术的食用香辛BAY 11-7082供应商料鉴定至关重要。在本研究中，采用TIAGEN植物基因组DNA提取试剂盒法、TIAGEN DNAsecure新型植物基因组DNA提取试剂盒法、QIAGEN DNeasy plant kit法、Nucleospin? Food kit法、改良CTAB法和SDS-CTAB法等6种方法对来自植物根、茎、叶、花蕾、果实及种子的19种常见JAK/STAT抑制剂食用香辛料的DNA进行提取，并比较各方法的提取效果。结果表明，QIAGEN DNeasy plant kit法和TIAGEN植物基因组DNA提取试剂盒法所得DNA的PCR扩增成功率最高，但QIAGEN DNeasy plant kit法提取的DNA浓度低，不利于后续研究。因此，本研究建议将TIAGEN植物基因组DNA提取试剂盒法作为食用香辛料基因组DNA提取的优选方法，并用该方法进行市售香辛料粉的DNA提取。