结论：细胞膜去极化导致的细胞膜磷脂酰肌醇合成代谢增加、KCNQ2/Q3功能增强的机制可能与高渗细胞外液影响细胞功能的机制类似。 第四部分PLC在细胞膜电位调节PIP2代谢过程中作用 目的：研究PLC在细胞膜去极化增大KCNQ2/Q3电流过程中的作用，并探索PLC所发挥作用的分子机制。 方法：体外转录的方法制备KCNQ2和KCNQ3通道的cRNA；使用双电极电压和钳记录表达在卵母细胞上的KCNQ2/Q3电流，并观察不同实验条件下电流的变化；薄层色谱的方法检测不同实验条件下卵膜细胞PIP2含量的变化；RNA干扰技术抑制卵母细胞中PLCγ1或PLCβ3的表达；western blot方法检测不同PLC亚型在卵母细胞上的分布情况以及AKt磷酸化情况；免疫共沉淀的方法验证PLCγ1酪氨酸磷酸化情况以及寻找更多PLCβ3和Gβ相互作用情况；免疫磷脂沉淀的方法观察PIP3与PLCγ1相结合情况的变化。 结果：(1) PLC抑制剂U73122对卵母细胞上的KCNQ2/Q3电流自身没有影响，但是对细胞膜去极化增大KCNQ2/Q3电流有阻断作用，也能阻断PMA增大电流的作用，另一PLC阻断剂Edelfosine对去极化增大电流也有阻断作用，但是其自AG-014699分子量身对KCNQ2/Q3有很强的增大作用；(2)薄层色谱结果显示U73122能抑制ND96-K升高细胞PIP_2的作用；(3)卵母细胞膜上主要分布的是PLCγ1亚型，免疫共沉淀结果表明去极化的卵母细胞PLCγ1的磷酸化水平明显增高；(4) RNA干扰实验结果表明PLCγ1表达受抑制后，细胞膜去极化增大电流的作用也受到部分的抑制；(5)免疫印迹结果表明细胞膜去极化使Akt磷酸化水平升高，PIP_3与PLCγ1的结合增多。