3%）患者携带EGFR突变；女性EGFR突变高于男性，不吸烟患者高于吸烟患者；三种主要腺癌亚型中，乳头状为主型EGFR突变率高于腺泡样为主型和实体型为主腺癌；EGFR状态与化疗疗效无关，EGFR突变是EGFR TKI（sTyrosine kinase inhibitors）疗效的预测因子；多因素分析显示EGFR突变是预后独立因素，EGFR突变患者预后优于野生型患者。 第二部分：检测430例肺腺癌患者的ALK重排状态，分析ALK重排与临床病理特征、治疗疗效及预后的关系，并评价FISH、Ventana

IHC及RT-PCR三种方法检测ALK重排的作用。430例患者中，ALK阳性率为10.7%，年轻患者中多见，实体型为主腺癌和腺泡样为主型多见，EGFR野生型患者中多见。ALK重排与性别、吸烟状态、分期无关。ALK阳性患者对EGFR selleck TKIs无效，ALK状态与化疗疗效及预后无关。采用FISH和Ventana IHC检测430例患者ALK状态，采用FISH、Ventana IHC和RT-PCR检测200例患者，Ventana IHC和FISH一致性好，敏感性和特异性分别为100%、98.2%，与FISH一致性为98.4%。RT-PCR的敏感性和特异性分别为95.7%、87.0%，与FISH的一致性为89.0%。三种方法检测结果显示RT-PCR敏感性更高。 第三部分：检测332例肺腺癌患者的KRAS状态，分析KRAS基因状态与临床病理特征、治疗疗效及预后的关系。332例患者中，24例（7.2%）携带KRAS突变，吸烟患者KRAS突变率高于不吸烟患者。KRAS不能作为判断TKI疗效、化疗疗效及预后的预测因子。332例肺腺癌患者EGFR、ALK、KRAS的频率分别为44.9%、9.6%、7.2%，肺腺癌患者三种基因的异常共计60.5%。 本文研究结果表明EGFR是肺腺癌患者最重要的驱动基因，EML4-ALK是仅次于EGFR的第二个重要的驱动基因，KRAS在肺腺癌患者中的意义和价值较小，还有待于对其通路及靶向药物作更加深入的研究。肺腺癌患者应首先进行EGFR检测，EGFR野生型患者检测ALK重排，如有条件可同时检测EGFR突变和ALK重排，KRAS突变检测的价值较小。EGFR突变患者应首选EGFR

TKIs治疗。 本文研究发现检测ALK重排的三种方法中，Ventana IHC与FISH一致性高，RT-PCR敏感性更高，能够鉴别不同的变异体或融合伴侣。鉴于Ventana IHC与RT-PCR指导选择克唑替尼治疗的价值仍缺乏循证医学证据支持，还需前瞻性临床试验验证或更多的临床数据的积累。因此，在当前情况下，如有条件，最好采用三种方法或至少两种以上方法进行检测ALK重排。
目的：1)研究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse Selleckchem GS-1101 large B-cell lymphoma, DLBCL)免疫学亚型：生发中心B细胞样(germinal centerB-cell 或者 like,GCB)亚型与非生发中心B细胞样(non-germinal centerB-cell like,non-GCB)亚型在新疆维吾尔族DLBCL中的分布；2)研究凋亡及耐药在新疆维吾尔族DLBCL不同免疫学亚型的中的作用及意义；3)探讨PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在新疆维吾尔族DLBCL中的作用及意义。方法：1)采用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)方法检测CD10、bcl-6. MUM1、GCET1和FOXP1在维吾尔族DLBCL中的表达。维吾尔族DLBCL免疫学亚型按Choi法则进行；2)采用流式细胞仪检测维吾尔族DLBCL不同亚型中细胞凋亡率；3)采用western

blot法检测凋亡相关蛋白(bcl-2、bcl-xL、bax、survivin)在维吾尔族DLBCL中的表达；4)采用RT-PCR方法检测维吾尔族DLBCL中耐药基因MRP1的表达情况；5)采用western blot法检测P-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白在维吾尔族DLBCL中的表达；6)采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox比例风险模型分析影响预后的因素。结果：1)新疆维吾尔族DLBCL患者中non-GCB型DLBCL所占比例显著高于GCB型DLBCL所占比例(70%vs30%,P<0.05)。新疆维吾尔族non-GCB组DLBCL的预后较GCB组DLBCL患者预后差(42.1%%vs74.5,P<0.05)；2)新疆维吾尔族non-GCB组和GCB组的凋亡率分别为：43.08±9.72%、56.17±6.88%,其差异具有统计学意义(P0.05)；4)bcl-2蛋白表达阴性组与阳性组的3年总生存(overall survival,OS)率分别为61.8%、33.3%,其差异具有统计学意义(P=0.039)；Survivin表达阴性组与阳性组的OS率分别为70.4%、32.6%,其差异具有统计学意义(P=0.013),而Bax与bcl-xL蛋白表达阴性组与阳性组的3年OS率无统计学意义(P>0.05);5)MRP1mRNA在GCB组与non-GCB组的阳性率分别为33.3%、66.7%,两组的表达差异具有统计学意义(P=0.017); MRP1基因扩增阴性组与MRP1基因扩增阳性组患者的3年OS分别为72.9%、30.

01),糖肾平小剂量组肾组织TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05),糖肾平大剂量组肾组织a-SMA蛋白表达显著降低(P<0.01),糖肾平中剂量组肾组织a-SMA蛋白表达降低(P<0.05),糖肾平小剂量组肾组织a-SMA蛋白表达降低,尚无统计学差异。正常对照组肾组织高表达Samd6、BMP7和E-Cadherin,明显高于模型组(P<0.01)；与模型组比较,糖肾平大剂量组肾组织中Smad6蛋白表达显著增加(P<0.01),糖肾平小、中剂量组肾组织中Smad6蛋白表达增加,有统计学差异(P<0.05),各治疗组肾组织BMP7蛋白的表达量均显著增加(P<0.01),糖肾平中、大剂量组肾组织E-Cadherin蛋白表达显著增加(P<0.01),糖肾平小剂量组肾组织E-Cadherin蛋白表达增加(P
随着核能的发展和核技术的广泛应用,人类受到人工电离辐射的机会越来越多。急性辐射损伤(ARI)发病急骤、病情险恶,射线照后白细胞减少,免疫功能未能恢复与重建,引发机体严重的炎症反应和出血,是ARI患者死亡的原因。因此,免疫功能的恢复,尤其是升高白细胞是ARI救治的关键环节。近年来研究发现,TLR4信号通路在炎症反应发生时参与其中,在机体细胞免疫和体液免疫过程中起重要的作用。目前,西医治疗辐射致白细胞减少药物疗效不甚满意,细胞因子等生物制品的应用效果较好,但药品价格高昂。故研制一种经济、高效、无毒的辐射防护中药尤为重要。目的用文献整理的方法,总结中医药防治辐射导致白细胞减少的用药规律。通过实验考查自拟中药复方对辐射损伤小鼠的防护作用及TLR4信号通路在其中的调控作用。方法理论研究方面,检索CNKⅠ、万方、维普数据库中中药复方内服汤剂治疗辐射所致白细胞减少的临床研究文献,对中药复方所含中药进行频数分析、药性分析。实验研究方面,首先,小鼠随机分为正常组和模型组,模型组以5

Tipifarnib订单 Gy的60CoY射线照射,照后3天,观察指标,复制Balb/c小、鼠急性辐射损伤模型。其次,初步考察中药复方对辐射损伤小鼠的防护作用,5 Gy射线照射小鼠后其白细胞下降严重,故调整照射剂量、取材时间及中药复方,自拟出方一和方二,两方均能凉血解毒、益气活血、滋阴,其中方一兼能补肾,方二兼能清热。实验分为正常组、模型组、小檗胺组、方一组、方二组。正常和模型组灌胃去离子水,其他各组灌胃相应药物,14天后以3.5 Gy 60Coγ射线照射,照后第7天检测指标,实验检测指标,包括WBC、LYMPH、外周血CD4+/CD8+比值；体重、免疫器官脏器指数及脾脏病理切片；骨髓病理切片、骨髓的CD 34+细胞、骨髓细胞周期、骨髓细胞凋亡。最后,考察中药复方对辐射损伤小鼠的防护作用及机制研究。通过上述实验发现方一具有一定的防护效果,但在升白细胞上还存在不足。本课题组用中医理论组成新方即方三,方三功能补气生血,健脾益肾,活血化瘀,滋阴清热。同时改进药物制剂工艺,调整取材时间,实验方法同上,照后第4天检测指标,除上述指标外,检测脾脏TLR4、Myd88、NF-κB、TNF-αmRNA水平,以及血清TNF-α含量。结果1、理论研究显示,纳入文献54篇,涉及处方54首,共计101味中药、582频次。治疗辐射致白细胞减少使用频次大于10次的中药有黄芪、当归等17味；涉及16类中药,有补虚药、活血化瘀药、利水渗湿药等；中药四气分类前3位为温、平、微温；中药五味频次前3位为甘、苦、辛；归经频次前3位为脾、肝、肾经。2、Balb/c小鼠辐射致损伤模型复制成功,5

selleck Histone Demethylase inhibitor Gy照射后小鼠体重、WBC、LYMPH、脾脏和胸腺指数显著降低,外周血CD 4+/CD 8+比值显著上升,脾脏萎缩,淋巴细胞减少,骨髓干细胞减少、脂肪化,TLR4、TNF-α的mRNA表达上升。3、Balb/c小鼠在受到3.5 Gy的照射7d后病理改变与上述实验基本一致,骨髓CD34+细胞下降,骨髓细胞周期阻滞,凋亡率升高。小檗胺能提高小鼠WBC、LYMPH,降低CD 并且 4+/CD 8+比值,恢复小鼠体重及胸腺指数,能保护脾脏淋巴细胞,保护骨髓,升高CD34+细胞,减少骨髓细胞凋亡。方一能够降低CD

4+/CD 8+比值,较好地恢复小鼠体重,保护脾脏淋巴细胞和骨髓细胞,降低骨髓细胞凋亡率。方二能减缓小鼠体重降低,升高脾脏指数,保护脾脏淋巴细胞、骨髓细胞。综合考虑方一优于方二,下一步实验继续考察方一。4、照后4 d,方一组能够降低CD 4+/CD 8+T淋巴细胞比值；恢复小鼠体重及胸腺指数,保护脾脏淋巴细胞和骨髓细胞,降低TLR4、MyD88、NF-κB表达作用趋势,尤其明显降低TNF-α表达水平,降低外周血TNF-α浓度。方三组能明显升高外周WBC、LYMPH,促进小鼠体重恢复,保护脾脏和骨髓细胞,降低TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α作用趋势,降低外周血TNF-α浓度。结论1、通过文献整理,发现治疗辐射损伤白细胞减少药物以味甘性温的补虚药为主,辅助以活血化瘀药、理气药,以达到调畅气血的目的,其核心药物是黄芪、当归。以方测证,可以判断辐射致白细胞减少症中医辨证多为气血两虚、脾肾不足,并兼瘀血内阻,治疗以补气生血、健脾益肾为主,兼以活血滋阴。2、本实验急性辐射损伤模型复制成功,方一和方三均对辐射损伤后小鼠有防护效果,其中方三对照后白细胞的防护效果较好,方三药物温凉并用补气生血,健脾益肾,活血化瘀,滋阴清热,与理论研究结果一致,进一步说明应用中医理论组方治疗辐射导致白细胞减少的良好效果。
目的:观察四氯化碳致实验性肝组织纤维化大鼠不同时期血清肝功能AST、ALT的变化以及TGF-β1和受体TGFβR1的表达,研究二者在肝纤维化发生、发展过程中的关系及茵陈蒿汤对造模大鼠血清TGF-β1及受体TGFβR1表达的影响。目的在于探讨肝纤维化进程中的分子机制和茵陈蒿汤保护肝功能以及其抗肝纤维化而下调促使肝纤维化相关细胞因子或阻断相关信号转导通路的作用机理。方法:选用四氯化碳作为诱导药物复制肝组织纤维化大鼠模型,实验选取清洁雄性SD大鼠50只、体重约250±20g随机分为正常组、模型组及干预组(茵陈蒿汤灌胃),观察实验过程不同时期(1周、2周、3周、4周、5周末,干预1周、2周末)各组大鼠肝组织病理结构变化情况及血清生化AST、ALT、细胞因子TGFβ1、TGFβR1表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠随造模时间延长肝组织出现从炎症反应到不同程度的肝纤维化的病理结构改变和损害,造模成功可见增生纤维组织、肝细胞结节再生及形成假小叶;血清TGFβ1及TGFβR1的表达显著,肝功能损害明显,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与模型组相比,干预组大鼠肝组织纤维化损害减轻明显,血清TGFβ1及TGFβR1的表达较模型组降低显著,肝功能损害减轻,且差异亦有统计学意义(P<0.01或P<0.

Given the complexity and redundancy of the PI3 K signaling network, PI3 K pathway inhibition may be most useful in combination with either chemotherapy or other targeted therapies, such as MEK inhibitors, anti-angiogenic therapy, and hormonal therapy, in appropriately selected OC patients. Here, we discuss the relevance of the PI3 K pathway in OC and provide an up-to-date review of clinical trials of novel PI3 K inhibitors selleck化学药品液面控制 alone or in combination with cytotoxics and novel therapies in OC. In addition, the challenges of drug resistance and predictive

biomarkers are addressed.
目的:研究隐丹参酮对Akt活性的影响及其在抑制HepG2细胞生长中的作用。方法:Western印迹检测隐丹参酮对Akt磷酸化的影响;CCK-8法检测隐丹参酮与MK2206或PP242联合用药对HepG2的生长抑制作用。结果:Western印迹证明隐丹参酮处理能够增强HepG2细胞Akt的磷酸化,同时发现隐丹参酮对Akt的增强作用依赖于mTORC2的活性;通过MK2206或PP242抑制Akt的反馈激活,能够明显促进隐丹参酮对HepG2细胞的生长抑制作用。结论:通过抑制Akt的反馈激活能够增强隐丹参酮的抗肿瘤作用,为隐丹参酮肿瘤治疗的临床应用联合用药提供了理论基础。
Head and neck squamous cell carcinoma is the sixth most common cancer in the world with approximately650000 new cases diagnosed annually.Next-generation molecular techniques and results from phase 2 of the Cancer

Genome Atlas becoming available have PF-04217903供应商 drastically improved our current knowledge on the genetics basis of head and neck squamous cell carcinoma.New insights and new perspectives on the mutational landscape implicated in head and neck squamous cell carcinoma provide improved tools for prognostication.More importantly,depend on the patient’s tumor subtypes and prognosis,deescalated or more aggressive therapy maybe chosen to achieve greater potency while minimizing the toxicity of therapy.This paper aims to review our current

knowledge on the genetic mutations and altered molecular pathways in head and neck squamous cell carcinoma.Some of the most common mutations in head and neck squamous cell carcinoma reported by the cancer genome atlas including TP53,NOTCH1,Rb,CDKN2 A,Ras,PIK3 CA and EGFR are described here.Additionally,the emerging role of epigenetics and the role of human papilloma virus in head and neck squamous cell carcinoma are also discussed Fedratinib分子重量 in this review.The molecular pathways,clinical applications,actionable molecular targets and potential therapeutic strategies are highlighted and discussed in details.
目的:观察爱罗咳喘宁对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonarydisease,COPD)大鼠模型支气管和肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen activatein kinase,p38MAPK)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、及水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)基因表达的影响,探讨爱罗咳喘宁方对COPD炎症及气道高分泌的作用及机制。方法:采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)加烟雾诱导COPD大鼠模型,随机将大鼠分为正常组、模型组、爱罗咳喘宁低、中、高剂量组。正常组、模型组灌胃生理盐水(15.52 m L·kg-1·d-1),爱罗咳喘宁口服液低、中、高剂量组分别灌胃(7.75,15.52,31.

The results showed that the stimulatory effect of IL-6 was {TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂| buy TNF-alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂半抑制浓度|TNF-alpha 抑制剂价格|TNF-alpha 抑制剂花费|TNF-alpha 抑制剂溶解度|TNF-alpha 抑制剂购买|TNF-alpha 抑制剂制造商|TNF-alpha 抑制剂查找购买|TNF-alpha 抑制剂订单|TNF-alpha 抑制剂 mouse|TNF-alpha 抑制剂 chemical structure|TNF-alpha 抑制剂分子量|TNF-alpha 抑制剂 molecular weight|TNF-alpha 抑制剂数据表|TNF-alpha 抑制剂 supplier|TNF-alpha 抑制剂体外|TNF-alpha 抑制剂细胞系|TNF-alpha 抑制剂 concentration|TNF-alpha 抑制剂 nmr|TNF-alpha 抑制剂体内|TNF-alpha 抑制剂 clinical trial|TNF-alpha 抑制剂s|TNF-alpha signaling 抑制剂|TNF-alpha pathway 抑制剂|TNF-alpha 信号通路 抑制剂|TNF-alpha signaling 抑制剂s|TNF alpha pathway 抑制剂s|TNF-alpha 信号通路 抑制剂s|TNF-alpha 抑制剂 library|TNF-alpha activity inhibition|TNF-alpha activity|TNF-alpha inhibition|TNF-alpha 抑制剂s library|TNF alpha 抑制剂 libraries|TNF-alpha 抑制剂 screening library|TNF-alpha high throughput screening|TNF-alpha 抑制剂s high throughput screening|TNF-alpha phosphorylation|TNF-alpha screening|TNF-alpha assay|TNF-alpha animal study| abolished following deletion of the-196 to-132 bp fragment.Conclusions IL-6 promotes GH secretion and synthesis by rat MtT/S somatotroph cells.The stimulatory effect of IL-6 on hGH gene promoter appears to require the activation of MEK and p38 MAPK,and a fragment of promoter sequence that spans the-196 to-132

bp of the gene,but may be unlinked with Pit-1 protein.
目的研究丹皮酚抑制黑素合成的相关的信号转导途径。方法以B16F10黑素瘤细胞系为对象,用不同的有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径干预物和丹皮酚共同处理细胞,采用多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法检测黑素含量,RT-PCR和Western blot检测酪氨酸酶的mRNA以及蛋白表达;并以Western blot法检测丹皮酚对不同MAPK途径关键激酶磷酸化蛋白表达的调节作用。结果在不同的MAPK信号途径抑制剂中,JNK1/2/3特异性抑制剂(SP600125)能够有效地拮抗丹皮酚对黑素合成的抑制作用,而且丹皮酚能够诱导磷酸化JNK/SAPK表达。结论JNK/SAPK途径参与了介导丹皮酚对黑素合成的抑制作用。
目的研究甲基环戊二烯羰基锰(MMT)诱导人SK-N-SH细胞凋亡的分子机制。方法MMT诱导SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞存活率,分光光度法检测活性氧(ROS)生成;化学发光法检测Caspase-3活性;Western

更多 blot法检测p38 MAPK磷酸化程度。结果在MMT诱导SK-N-SH细胞过程中,细胞ROS生成量为正常组的5.2倍(P<0.01);抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)及二硫苏糖醇(DTT)可有效抑制细胞ROS生成(P<0.01),提高细胞存活率(P<0.01);在这一过程中,Capase-3活性明显增强,为对照组的3.01倍(P<0.05),抑制Caspase-3的活性(P
目的观察不同浓度和时间修饰的糖基化人血清白蛋白作用下,人脐静脉内皮细胞内黏附连接蛋白钙黏着蛋白的形态结构变化,并初步探讨其机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,分别用不同浓度和时间修饰的糖基化人血清白蛋白处理,用免疫荧光染色法、激光共聚焦显微镜观察钙黏着蛋白在内皮细胞的形态和分布变化。分别用可溶性的修饰的糖基化人血清白蛋白受体的抗体、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂或转染重组腺病毒突变体转染预处理后再观察晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白对内皮细胞形态的影响。结果修饰的糖基化人血清白蛋白以时间和剂量依赖方式引起内皮细胞黏附连接钙黏着蛋白形态结构的改变;丝裂原活化蛋白激酶通路抑制剂(SB203580、PD98059、SP600125)和Rho激酶抑制剂Y27632均可减轻晚期糖基化终产物对钙黏蛋白的影响;转染显性失活的细胞外信号调节激酶上游激酶MEK1和p38丝裂原活化蛋白激酶上游激酶MKK6b及p38显性失活的p38α和p38β重组腺病毒突变体,均可减轻晚期糖基化终产物对钙黏蛋白形态结构的影响,而转染组成性激活的MEK1和MKK6b的重组腺病毒本身即可引起钙黏蛋白形态结构的变化。结论晚期糖基化终产物刺激可以引起钙黏蛋白分布和形态的变化,这一作用可能是丝裂原活化蛋白激酶通路细胞外信号调节激酶、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路和c-jun氨基末端激酶(JNK)/应激激活的蛋白激酶(SAPK)介导的,Rho激酶可能参与此过程。
目的:研究脂联素对成骨细胞的分化作用。方法:免疫印迹检测体外培养成骨细胞脂联素受体(adiponectin

什么 receptor,AdipoR)表达。用酶联免疫吸附试验检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;用放射免疫测定法测定骨钙素(osteocalcin,OC);并观测脂联素对矿化的影响。用siRNAs抑制AdipoR1表达,观察脂联素对成骨细胞分化作用的变化。结果:检测到成骨细胞AdipoR1蛋白表达。脂联素可提高ALP活性和促进OC分泌,并促进矿化结节形成,此作用可被AdipoR1的siRNAs转染抑制。脂联素作用于成骨细胞可诱导p38和JNK磷酸化,而p38抑制剂SB203580可减轻其对成骨细胞ALP活性的影响。结论:脂联素通过诱导p38信号转导途径诱导人成骨细胞分化。
目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对大鼠膝关节骨性关节炎关节软骨的影响。方法40只SD大鼠随机分为A、B、C、D 4组。A、B、C组行单侧膝关节前交叉韧带切除术,A组于术后行关节腔内注射0.1 mL浓度为100μm/L SB203580,B组注射等量生理盐水做为实验对照,C组不予任何处理为空白对照组,D组为正常对照组。术后8周处死动物。观察各组标本大体评分、Mankin评分、软骨细胞凋亡指数以及软骨Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果40只大鼠均纳入结果分析。大体评分及Mankin评分显示A组软骨退变明显轻于B、C组(P<0.05);各组均发现有凋亡的软骨细胞,A组软骨细胞凋亡指数低于B、C组(P<0.05),D组软骨细胞凋亡指数明显低于其他3组(P<0.05);A组关节软骨Ⅱ型胶原染色吸光度值大于B、C组(P<0.

05）。结论：本研究首次在横纹肌肉瘤组织和细胞系中检测到RAS/PIK3CA共突变，并再次证实RAS和PIK3CA突变的存在，提示RAS家族、PIK3CA突变可能参与了横纹肌肉瘤的发生发展。
研究背景： 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升,40-70岁是乳腺癌的高危年龄。据统计,全世界每年约有130万人诊断为乳腺癌,50万人死于乳腺癌,乳腺癌已经成为妇女健康的最大威胁之一。 乳腺癌的治疗手段目前主要有手术、放疗、化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗等。其中,化疗在乳腺癌综合治疗中具有非常重要的地位,而蒽环类药物是被公认的治疗乳腺癌最有效的药物之一,但与其它化疗药物一样,蒽环类药物的毒副反应较大,尤其是其剂量累积性心脏毒性限制了它的应用。为解决这一问题,靶向给药方式受到高度重视,而纳米技术在靶向给药的研究中被广泛应用。

纳米材料指直径在1-100nm之间的物质,在生物医学领域,稍微大一点直径的颗粒也称为纳米材料。纳米材料因其直径非常小的特点而具有区别于传统材料不同的性质特点,包括表面效应、体积效应及量子尺寸效应。纳米颗粒凭借这些独特的性质特点被广泛应用于工程、化学、生物及医学等方面。 在医学肿瘤学领域,纳米材料主要作为载体来承载化疗药物、细胞因子、抗体等,对肿瘤细胞进行靶向治疗,从而提高药物疗效、减轻毒副作用、提高生物利用度。纳米药物载体主要分为以下4类：1.普通载药纳米颗粒,将药物与纳米颗粒直接高度结合,提高原本理化性质不稳定而易降解的药物的生物利用度；2.靶向定位载药纳米颗粒,其表面有肿瘤靶向配体,使药物准确地输送到肿瘤病灶,提高疗效、减少全身毒副反应；3.磁性载药纳米颗粒,其内部有氧化铁,氧化铁的超顺磁性使药物在外加磁场下达到被动靶向和MRI显像的目的；4.多功能型载药纳米颗粒,是集载药、智能释药、靶向、显像等多种功能于一体的纳米颗粒。 理想的纳米材料作为药物载体需要具有以下特点：性质稳定,无毒、无刺激性,不致畸,颗粒直径小且分布窄；能够保护药物增加其稳定性；可以感应外界环境如酸碱、温度、酶及氧化还原剂等；可以连接配体并能承载多种药物；可以集载药及显像等多功能于一体。目前研究比较多的纳米材料有脂质体、超顺磁氧化铁、量子点及高分子聚合物等。聚合物又分为无机类分子和有机类分子,无机类分子包括纳米羟基磷灰石和介孔硅基材料,有机类分子分为有机小分子和高分子材料,高分子材料分为天然大分子和人工合成大分子如乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、两亲性共聚物等。高分子材料具有良好的生物相容性和可降解性能等优点,是一种非常有前景的纳米材料。脂质体,它是类似生物膜结构的双分子小囊,具有单个或多个双层磷脂膜的囊泡,其主要成分是磷脂,磷脂分子中磷酸基团具有亲水性,碳氢链具有疏水性；它免疫原性小且有较好的生物相容性；它可以使药物缓释,延长药物半衰期长及药效持续时间；因为肿瘤生长部位毛细血管的通透性增加及细胞的主动内吞,载药脂质体可以直接渗透至肿瘤部位提高药物疗效,同时避免高浓度游离药物渗透正常组织从而降低全身毒副反应。另外,超顺磁氧化铁作为最有希望的纳米颗粒被广泛研究,这主要源于其超顺磁性使纳米颗粒在外加磁场下定向移动,从而使纳米颗粒聚集于靶区并且能被核磁共振显像,达到药物靶向、示踪及监测目的。然而,单纯氧化铁纳米颗粒在水中很不稳定,一些疏水材料如油酸、聚乙二醇、普朗克尼、PLGA等可以包被氧化铁颗粒,使其生物相容性明显增加。研究者们在不断增加磁性纳米颗粒的生物相容性的同时,也在不断探索药物智能释放的方法。已有研究报道,一些纳米材料可以在外界环境如氧化还原剂、温度、PH等刺激下降解实现药物的智能释放。然而,这些研究多数停留在化学反应的水平,少数涉及细胞水平,动物水平的相关研究更是鲜有。

INCB28060 因为 为实现阿霉素靶向给药,我们采用阿霉素/聚酰胺@超顺磁氧化铁纳米颗粒(doxorubicine/rPAA@superparamagnetic iron oxide nanoparticles, DOX/rPAA@SPION),在动物水平,对其治疗乳腺癌的疗效、毒副反应、生物分布及MRI显像进行研究。DOX/rPAA@SPION主要有3部分组成：阿霉素(DOX),以rPAA为骨架的高分子聚合物(reducible polyamidoamine graft poly(ethylene glycol)/dodecyl amine copolymers,rPAA),超顺磁氧化铁(SPION)。由于DOX/rPAA@SPION可以在外部磁场的作用下集中于肿瘤组织,因而可达到被动靶向给药和核磁共振显像示踪监测的目的；此外rPAA含叔胺及二硫键,对酸及还原剂敏感,而肿瘤组织内酸性高、还原剂丰富,到达肿瘤部位的DOX/rPAA@SPION纳米颗粒rPAA降解释放阿霉素,杀灭肿瘤细胞,提高疗效；纳米颗粒独特的空间结构也可以降低化疗药物毒副反应及延长药物半衰期。 目的： 1.通过建立MDA-MB231乳腺癌裸鼠模型,探索DOX/rPAA@SPION磁性纳米颗粒在动物水平的抑瘤效果。 2.通过观察裸鼠活动状态、体重变化及对心脏、肝脏、肾脏进行HE染色,了解DOX/rPAA@SPION磁性纳米颗粒在体内的毒副反应。 3.通过对裸鼠肿瘤组织、心脏、肝脏、肾脏进行普鲁士蓝染色,检测DOX/rPAA@SPION磁性纳米颗粒在体内分布情况。 点击此处 4.通过对尾静脉注射DOX/rPAA@SPION前、注射后12h及24h的荷瘤裸鼠进行MRI显像,探讨应用MRI对DOX/rPAA@SPION纳米颗粒进行显像及监测的可行性。 方法： 1.培养MDA-MB231乳腺癌细胞：复苏细胞,采用含10%胎牛血清的Leibovitz’s15(L-15)培养基培养,待细胞处于对数生长期时,消化细胞,计数,将5×106细胞溶解于150u1无血清L-15培养基中。 2.从南方医科大学实验动物中心购买5周龄裸鼠,SPF级饲养,观察裸鼠活动、觅食、精神状态等,约1周左右裸鼠完全适应新环境。 3.建立MDA-MB231裸鼠乳腺癌模型：将第1步得到的150ul MDA-MB231细胞悬液震荡混匀,注射于完全适应环境的裸鼠右侧胁肋部皮下。 4.DOX/rPAA@SPION磁性纳米颗粒的溶解及磁性验证：清洁并用75%酒精消毒细胞超声粉碎仪,将适量无菌PBS溶液移入装有DOX/rPAA@SPION纳米颗粒沉淀的容器内,探头置于PBS液面下,调节超声功率至200w,维持30mmin。待沉淀完全溶解后,置于磁场观察纳米颗粒的顺磁性。 5.

0001-0.05)。为了进一步验证新型药物组合协同抑制KRAS突变实体瘤生长的机制,提取肿瘤组织RNA和蛋白质进行Q-PCR分析及免疫印迹实验。实验结果显示,联合用药组上调肿瘤组织中p21的表达,上述结果说明联合抑制PLK1和ROCK信号通路可通过增加p21的表达诱导有丝分裂压力发挥强烈抑制KRAS突变肿瘤的作用,为KRAS突变肿瘤的治疗提供了新的策略。综上所述,本研究揭示了能扰乱KRAS对其协同致死基因的依赖性的新型药物组合,靶向肿瘤细胞基因型的药物组合研究具有相当的医学转化价值,可以指导KRAS突变肿瘤的临床治疗。
第一部分EPAS1通过EGFR和MET信号通路调控非小细胞肺癌TKI耐药性目的:肺癌已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第1位的恶性肿瘤。非小细胞肺癌包括常见的鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌等,与小细胞癌相比其癌细胞生长分裂较慢,扩散转移相对较晚。非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%,其中约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。近年来随着药物基因组学的开展,非小细胞肺癌的药物相关研究大幅度提升,一方面,为更好地发挥化疗效应起到指导作用;另一方面越来越多的靶向药物被研制出来,在肿瘤治疗方面起到了许多令人鼓舞的成果。在肺癌的靶向治疗、转移因素、耐药性方面我们做了许多探索。目前针对第一代靶向治疗药物EGFR-TKI,以吉非替尼和厄洛替尼为代表,对于初治的非小细胞肺癌患者,中位PFS可达10个月,随之而来的耐药性函待解决。因此相关领域一些新的蛋白基因受体研究异常火热。本研究旨在探究是否有其他因子参与了EGFR与MET的调控,我们对全基因组中HIF-1α的类似物进行了筛查。其家族成员EPAS1在EGFR调控MET中的作用我们进行了系统研究,我们将HA标记的EPAS1(HA-EPAS1)与Myc标记的EGFR(Myc-EGFR)共同转染至HCC827细胞中,并使用HA的抗体进行免疫共沉淀实验。以确认这种结合是否具有细胞特异性,同时我们在A549中进行了相同的实验。为了进一步探究EPAS1和T790M

抑制剂 Library EGFR的结合是否为直接结合,我们使用了DTME作为交联剂进行蛋白交联实验。再者,为了研究MET信号通路是否受EPAS1与T790M

EGFR的相互作用影响,我们在HCC827细胞系中同时分别过表达EPAS1、野生型EGFR以及T790M EGFR,并检测MET的表达量。关于EPAS1与T790M EGFR是否依赖于配体,我们构建了配体结合域缺失的载体ΔN-T790M,并将其与EPAS1共同转染至HCC827细胞中。为了探究EPAS1与T790M EGFR的相互作用对NSCLC药物耐受的作用,我们将EPAS1与T790M EGFR共同转染至HCC827细胞中以EPAS1载体的空载作为对照,并使用吉非替尼和埃罗替尼处理细胞,用克隆实验检测分别共转染EASP1与T790M Selleckchem Selumetinib EGFR以及野生型EGFR对NSCLC对TKI处理的药物抵抗作用。最后为了探究EPAS1与T790M EGFR的相互作用是否通过MET信号通路来发挥作用的,我们敲低了内源的MET的表达并检测了细胞增殖和生长情况。方法:细胞培养NSCLC细胞系HCC827和A549购自美国ATCC(马纳萨斯)并且从收到细胞到完成文章不超过六个月时间。细胞用含10%胎牛血清,100U/ml青霉素,100μg/ml链霉素,2 m M-左旋谷酰胺的DMEM培养基培养,同时将细胞放入37℃含5%CO2的恒温培养箱中培养。质粒构建将EPAS1编码序列克隆到N端含HA标签的p CMV-HA质粒中,同时将配体结合域确实的突变型EGFR(氨基酸2-620)克隆到N端含Myc标签的pc DNA3.1质粒中。免疫荧光将HCC817转染HA-标记的EPAS1质粒并将细胞培养在细胞培养小室中,检测时用4%甲醛固定三十分钟,接着使用0.2%Triton

X-100破膜5分钟,使用5%BSA进行封闭。使用鼠源的抗HA的一抗室温孵育并使用Alexa Fluor 488羊抗鼠荧光二抗室温孵育30分钟后使用DAPI作为DNA染料。在抗体孵育后,细胞用PBS清洗并用抗荧光猝灭封片剂进行封片。免疫沉淀和蛋白免疫印迹蛋白裂解使用RIPA裂解液,配方为50 Trichostatin A订单 m M Tris-HCl,p H 7.4,150 m M Na Cl,1 m M EDTA,1%Triton X-100,1%脱氧胆酸钠,0.1%SDS并添加蛋白抑制剂。将裂解完的细胞用4℃的冰冻离心机12000rpm/min离心10min,将上清与琼脂糖球体以及抗HA和抗Myc的抗体4℃共同孵育2h。将孵育后的琼脂糖珠用裂解液清洗三遍后用最终洗脱液(50 m M Tris,p H 7.5,and 50 m M Na Cl)清洗两遍。将琼脂糖朱用SDS-PAGE上样缓冲液洗脱下来并95℃热变性5min,使用SDA-PAGE胶进行蛋白分离并用转膜仪将蛋白转移到PVDF膜上。将转好的膜用PBST(PBS,0.1%Tween-20)溶解的含5%脱脂奶粉的封闭液进行封闭2h,并在4℃孵育一抗过夜。在用PBST清洗后,用含辣根过氧化酶的二抗进行孵育2h后再用PBST清洗后进行爆片。蛋白交联实验将HCC827细胞共转染EPAS1和野生型或突变型T790M EGFR后收集细胞并在4℃冰冻离心机中800g离心10 min并用PBS重悬。将交联剂用DMSO溶解后备用并将其加入到细胞悬液中使终浓度为0.1m M,在4℃孵育2 h。使用RIPA裂解液进行理解并进行蛋白免疫沉淀反应。蛋白使用添加DTT或未添加DTT的SDS-PAGE上样缓冲液进行洗脱并进行蛋白免疫印迹。RNA干扰和荧光定量PCR为了进行RNA干扰实验,靶向MET的慢病毒载体sh RNA V2LHS_113750和V3LHS_318637购自GE Dharmacon公司。细胞使用慢病毒转染体系并用1μg/ml嘌呤霉素进行筛选得到稳定敲低的细胞株。为了检验干扰效率我们提取了细胞的总RNA并使用全式金Easy Script Reverse Transcriptase反转1μg总RNA,同时使用GAPDH m RNA水平进行标准化并将所有基因表达量展现为相对值。细胞增殖,生长和存活分析细胞生长使用MTT法进行分析。细胞使用TKIs处理72 h后进行检测并标准化为空白组的表达。克隆形成实验用来检测细胞生长情况。所有浓度的药物处理经过五次单独的检测并展示为平均值±标准误。数据分析所有的数据都展示为平均值±标准误。使用双尾检测的T检验来检测两组之间的差异,当p
1.

结果显示,与对照组比较,GW501516可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PAI-1表达,且此效应呈浓度和时间依赖性(P<0.05);siRNA沉默PPARδ的表达后,可阻抑GW501516对HUVEC细胞PAI-1表达的促进作用;TGFβ-Smad3信号通路抑制剂SB-431542与SIS3均可降低HUVEC细胞pSmad3蛋白的表达,而细胞PAI-1表达也随之降低.结果提示,GW501516可促进HUVEC细胞PAI-1的表达,其机制可能与TGFβ-Smad3信号通路有关.
目的:观察转化生长因子-β1受体1对肾阳虚不育模型大鼠血清性激素水平、精子质量以及细胞色素P-19表达的影响。方法:40只SD大鼠随机分为4组:空白对照组、模型组、正常+阻滞组及模型+阻滞剂组,每组10只。采用腺嘌呤诱导肾阳虚不育模型,在解剖显微镜下,对阻滞组大鼠睾丸间质内进行显微注射。采用放射免疫法检测各组大鼠性激素水平;精子自动检测仪检测精子的密度及活率;用免疫组织化学法检测大鼠睾丸中TGF-β1/CYP19表达。结果:与模型组相比,正常+阻滞组和模型+阻滞剂组睾酮(Testosterone,T)和雌二醇(Estradiol

2,E2)水平均显著升高(P<0.05),大鼠精子密度和精子活率以及快速前向运动精子率(A级)、满速前向运动精子率(B级)显著上升(P<0.05),睾丸CYP19水平均显著升高(P0.05);与模型组相比,正常+阻滞组和模型+阻滞剂组TGF-β1均有降低(P0.05)。结论:TGF-βR1在睾丸表达异常与肾阳虚不育模型大鼠精子质量提高和血清性激素水平改变有关。
Multiple 确认细节 myeloma is

a hematological malignancy inwhich clonal plasma cells proliferate and accumulate within the bone marrow. The presence of osteolytic le-sions due to increased 并且 osteoclast(OC) activity and sup-pressed osteoblast(OB) function is characteristic of the disease. The bone marrow mesenchymal stromal cells(MSCs) play a critical role in multiple myeloma patho-physiology, greatly promoting the growth, survival, drug resistance and migration of myeloma cells. Here, we specifically discuss on the relative contribution of MSCs to the pathophysiology of osteolytic lesions in light of the current knowledge of the biology of my-eloma bone disease(MBD), together with the reported genomic, functional and gene expression differences between MSCs derived from myeloma patients(pMSCs) and their healthy counterparts(dMSCs). Being MSCs the progenitors of OBs, pMSCs primarily contribute

to the pathogenesis of MBD because of their reduced osteogenic potential consequence of multiple selleck化学药品 OB inhibi-tory factors and direct interactions with myeloma cells in the bone marrow. Importantly, pMSCs also readily contribute to MBD by promoting OC formation and ac-tivity at various levels(i.e., increasing RANKL to OPG expression, augmenting secretion of activin A, uncou-pling ephrinB2-EphB4 signaling, and through augment-ed production of Wnt5a), thus further contributing to OB/OC uncoupling in osteolytic lesions. In this review, we also look over main signaling pathways involved in the osteogenic differentiation of MSCs and/or OB activity, highlighting amenable therapeutic targets; in parallel, the reported activity of bone-anabolic agents(at preclinical or clinical stage) targeting those signaling pathways is commented.

The underlying mechanisms include inhibiting apoptosis and preserving normal tissue functions. MGCD0103分子重量 However, aberrant Wnt signaling underlies a wide range of pathologies in humans, and its various components contribute to cancer. Moreover, studies have suggested that Wnt/ β-catenin signaling may lead to radioresistance of cancer stem cell. These facts markedly complicate any definition of the exact function of the Wnt pathway.
目的探讨Tau蛋白调控Fyn信号通路在阿尔茨海默病(AD)大鼠发病中的作用机制。方法雄性SD大鼠60只随机分为正常组,模型组及观察组。采用β淀粉样蛋白毒性片段(Aβ25～35)海马注射制备AD大鼠模型。10μmol/L SB216763(Tau蛋白抑制剂)注射至观察组大鼠脑组织。采用SABC法对大鼠脑组织中Tau蛋白进行免疫组化检测,Western印迹检测Fyn和Fak的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠脑组织Tau蛋白含量及Fyn和Fak的表达显著增加(P<0.05);与模型组相比,观察组Tau蛋白含量及Fyn和Fak的表达显著增加(P
糖原合酶激酶3(GSK-3)尤其是GSK-3β亚型广泛参与真核细胞有丝分裂、细胞分化、细胞骨架组装及上皮细胞存活等重要生命活动。长期使用锂制剂(GSK-3抑制剂)的患者会出现尿崩症,提示GSK-3β在肾脏尿液浓缩功能中发挥重要作用。肾移植受者应用雷帕霉素后GSK-3β活性被抑制,导致足细胞损伤发生蛋白尿。GSK-3β对于肾小管浓缩功能及足细胞构成完整有效的滤过屏障有重要作用。
瘦素是主要由脂肪组织合成分泌的多肽类激素,主要生理功能为调节能量代谢。在下丘脑中,瘦素与长型瘦素受体结合后,抑制了食欲,控制体重。瘦素受体被激活后,活化多种信号通路的关键分子如STAT3、PI3K、MAPK、CDK5和GSK3β等,形成分子信号通路网络,发挥生理功能。因此,瘦素抵抗还是肥胖症的首要因素瘦素。瘦素除了控制体重外,越来越多的研究表明,瘦素在认知和神经保护作用方面也具有重要作用,在中枢神经系统疾病如帕金森病、阿茨海默病、癫痫和缺血性脑中风中降低神经元退变,起到治疗作用,本文就瘦素的神经保护作用方面做一综述。
糖尿病心肌对缺血/再灌注损伤的耐受性下降,且减弱缺血预处理和后处理的心肌保护作用。再灌注前以挥发性麻醉剂、腺苷、促红细胞生成素等药物后处理激发机体内源性保护机制,具有减轻心肌缺血/再灌注损伤、便于临床应用等特点。糖尿病心肌的药物后处理现象及其机制是临床研究的热点,本文综述糖尿病时心肌对于药物后处理反应的改变及其分子机制,为临床糖尿病心肌缺血再灌注损伤的防治提供新的思路。
目的:探讨糖原合成酶激酶-3β(Glycogen

synthase kinase-3β,GSK-3β)对肺癌A549细胞增殖的影响及可能机制。方法:MTT法检测不同浓度曲古抑菌素A(TSA)和联合GSK-3β抑制剂SB216763对A549细胞增殖的影响;Western {TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂| buy TNF-alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂半抑制浓度|TNF-alpha 抑制剂价格|TNF-alpha 抑制剂花费|TNF-alpha 抑制剂溶解度|TNF-alpha 抑制剂购买|TNF-alpha 抑制剂制造商|TNF-alpha 抑制剂查找购买|TNF-alpha 抑制剂订单|TNF-alpha 抑制剂 mouse|TNF-alpha 抑制剂 chemical structure|TNF-alpha 抑制剂分子量|TNF-alpha 抑制剂 molecular weight|TNF-alpha 抑制剂数据表|TNF-alpha 抑制剂 supplier|TNF-alpha 抑制剂体外|TNF-alpha 抑制剂细胞系|TNF-alpha 抑制剂 concentration|TNF-alpha 抑制剂 nmr|TNF-alpha 抑制剂体内|TNF-alpha 抑制剂 clinical trial|TNF-alpha 抑制剂s|TNF-alpha signaling 抑制剂|TNF-alpha pathway 抑制剂|TNF-alpha 信号通路 抑制剂|TNF-alpha signaling 抑制剂s|TNF alpha pathway 抑制剂s|TNF-alpha 信号通路 抑制剂s|TNF-alpha 抑制剂 library|TNF-alpha activity inhibition|TNF-alpha activity|TNF-alpha inhibition|TNF-alpha 抑制剂s library|TNF alpha 抑制剂 libraries|TNF-alpha 抑制剂 screening library|TNF-alpha high throughput screening|TNF-alpha 抑制剂s high throughput screening|TNF-alpha phosphorylation|TNF-alpha screening|TNF-alpha assay|TNF-alpha animal study| Blot法检测各组细胞中GSK-3β和磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)蛋白表达的变化;流式细胞仪分析细胞周期;免疫细胞化学法检测p27蛋白水平。结果:TSA以剂量依赖性抑制A549细胞生长,使细胞周期阻滞于G0/G1期,用SB216763预处理后明显减弱了TSA对A549细胞的生长抑制作用和细胞周期阻滞。TSA对细胞GSK-3β蛋白表达无明显影响,却降低了pGSK-3β蛋白水平,p27蛋白表达增加;抑制剂SB216763使pGSK-3β表达增加,下调p27蛋白水平。结论:GSK-3β参与并促进了TSA对肺癌细胞的生长抑制和细胞周期阻滞效应,其机制可能与GSK-3β对p27蛋白的调节有关。
综述糖原合成酶激酶-3β与2型糖尿病、阿尔茨海默病、肿瘤等疾病发生发展的关系及其抑制剂的研究和开发。糖原合成酶激酶是普遍存在于真核细胞中的一种多功能丝氨酸/苏氨酸激酶,参与多条细胞信号传导通路,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及基因表达,它的活性异常与多种疾病的发生发展有着密切的关系,已成为备受关注的药物靶点。
Objective:To

Ixazomib investigate the expressions of GSK-3beta,Beta-catenin and PPAR-gamma,and their relationship in medulloblastoma,and to explore their value in clinic application. Methods:Immunohistochemical staining with SP method was conducted to determine the expressions of GSK-3beta,Beta-catenin and PPAR-gamma in 48 cases of medulloblastoma and 10 normal cerebellar tissues. Results:The rate of abnormal expressions of beta-catenin and PPAR-gamma in MB was higher than that in normal. Conversely,GSK-3beta in MB was lower than that in the normal (P

目的研究糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂抗前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的效用。方法建立前列腺癌PC-3和LNCaP/Bcl-xL细胞株裸鼠移植瘤模型,观测GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)及SB216763腹腔内给药后移植瘤重量及体积的变化。同时通过BrdU掺入的免疫组化染色探讨移植瘤的增殖状态,TUNEL染色比较对移植瘤细胞凋亡的影响。结果LiCl及SB216763均可明显抑制移植瘤生长(P<0.05)。与对照组相比,LiCl给药组细胞BrdU标记明显降低(P<0.

05)。Ad-NK4和BOR联用的细胞抑制率和诱导凋亡比例均显著高于单用Ad-NK4或BOR。同样,Ad-NK4和BOR联用组Cleaved caspase-3和BAX蛋白水平均明显高于单独作用组,而BCL-2蛋白水平却相反,同时在联用组BAX/BCL-2比率增加。结论:通过活化Caspase-3和上调BAX/BCL-2比率的途径,Ad-NK4可增强BOR体外抗骨髓瘤RPM I 8226细胞作用。
[目的]研究c-Met抑制剂PHA665752联合5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人结肠癌细胞SW620生长的抑制作用及机制。[方法]选取48只4周龄的雄性裸鼠皮下接种人结肠癌细胞SW620,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(2.5%二甲亚砜稀释液隔日用药)、5-Fu组(40mg/kg 5-Fu每隔3日给药)、PHA组(25mg/kg PHA665752隔日给药)、5-Fu+PHA组(40mg/kg 5-Fu每隔3日给药+25mg/kg PHA665752隔日给药)各12只。免疫组织化学SP法检测瘤体组织内的E-cadherin和Ki-67蛋白表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。[结果]治疗结束时,5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的体重和瘤体体积均明显低于对照组(P<0.05),且5-Fu+PHA组裸鼠的瘤体体积显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的AI值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。[结论]c-Met抑制剂PHA665752联合5-Fu对人结肠癌细胞SW620生长的抑制有协同作用,其机制可能与上调E-cadherin、下调Ki-67表达有关。
目的建立对吉非替尼(gefitinib)耐受的NSCLC细胞株,并观察其药理学特性。方法采用HGF和浓度递增的gefitinib处理HCC827细胞以诱导细胞耐药;MTT法测试细胞活力和药物敏感性;克隆形成和Edu染色验证gefitinib对细胞的生长抑制作用;qRT-PCR和Western

CP724714 获悉更多 blot实验检测细胞中c-Met表达。结果 HGF的使用可缩短HCC827GR耐药细胞的诱导时间;gefitinib可明显抑制HCC827亲本细胞的细胞活力、克隆形成和细胞增殖,而对HCC827GR细胞的生长抑制作用很弱;HCC827GR细胞c-Met高表达,对c-Met抑制剂高度敏感。结论成功并高效诱导了对gefitinib耐药的HCC827GR细胞,该细胞生长依赖c-Met蛋白活性,对c-Met抑制剂较敏感,可作为c-Met抑制剂的表型筛选模型。
目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)的保护作用,提高肺血管内皮细胞对缺氧的耐受性,增加损伤后的存活率,改善其功能,为防止缺氧导致的肺动脉高压提供实验依据。方法体外培养HPMECs,用物理方法建立缺氧损伤模型。实验分为空白对照组、缺氧损伤组、HGF组、PHA665752组(HGF抑制剂组)。采用免疫荧光法鉴定第7代HPMECs,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,倒置显微镜下计数在不同干扰条件下HPMECs的贴壁细胞数量,Western

blot法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达情况。结果缺氧损伤组细胞贴壁率下降,ICAM-1的表达量明显高于空白对照组(P<0.01);HGF组细胞存活率较缺氧损伤组明显提高(P<0.01),细胞贴壁率较缺氧损伤组明显增加(P<0.01),ICAM-1的表达量明显下降(P<0.01);PHA组细胞存活率较缺氧损伤组和HGF组均有明显差异(P<0.01),细胞贴壁率较缺氧损伤组明显下降(P<0.01),ICAM-1的表达明显上升(P
乳腺癌分子亚型中基底细胞样乳腺癌预后较差,尚无有效的全身治疗措施,研究发现其分子表型有明显的特异性。该文综述近年来基底细胞样乳腺癌的分子病理学研究,分析其特异性的分子学特征,探讨肿瘤发生机制以及潜在的有效治疗靶点。
[目的]探讨肝细胞生长因子受体(c-Met)可溶性形式(sMet)在鼻咽癌患者血浆中的水平变化及临床意义。[方法]收集84例鼻咽癌患者和84名正常人的血浆标本,ELISA检测血浆中sMet水平,并以ROC曲线评价sMet水平对鼻咽癌发生风险的临床预测价值。[结果]鼻咽癌Ⅰ～Ⅱ期患者血浆中sMet的水平[(293.6±15.8)ng/ml]及鼻咽癌Ⅲ～Ⅳ期患者血浆中sMet的水平[(343.8±12.6)ng/ml]分别为正常对照组表达水平[(224.2±13.5)ng/ml]的1.31、1.53倍(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血浆sMet水平和发生鼻咽癌的风险存在密切相关性,具有明显的临床诊断价值。[结论]sMet可能是鼻咽癌早期诊断的一个潜在的血浆标志物。
目的探讨Ezrin、c-Met和CD44v6在胃癌中的表达情况,分析其相关性以及与胃癌生物学特性的关系。方法采用免疫组织化学方法检测Ezrin、c-Met和CD44v6在130例胃癌组织中的表达情况。结果

一般 130例胃癌组织中Ezrin阳性表达率为61.0%;c-Met阳性表达率为58.0%;CD44v6阳性表达率为53.0%。Ezrin和CD44v6的表达情况与临床分期、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05);c-Met的表达与浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05)。胃癌组织中Ezrin分别与c-Met、CD44v6表达水平呈正相关,且c-Met与CD44v6表达呈正相关(P
目的探讨重组粒细胞集落刺激因子(G-SCF)联合携带肝细胞生长因子(HGF)基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对野百合碱诱导的实验性肺动脉高压(PAH)大鼠的治疗效果。方法取3周龄雄性SD大鼠骨髓,经贴壁筛选法体外培养并纯化MSCs,利用腺病毒(Ad)介导的基因转染方法,将HGF基因导入MSCs。将50只SD大鼠随机分为5组(每组10只):PAH组,采用腹腔注射野百合碱(60mg/kg)复制PAH模型后,经颈内静脉移植1ml低糖伊戈尔培养基(L-DMEM);MSCs组,复制PAH模型后,移植5×106/L的空腺病毒载体转染的MSCs细胞悬液1ml;G-CSF组,经腹腔注射G-SCF[100μg/(kg.d)],连续5d;HGF组,移植5×106/L携带HGF基因的MSCs细胞悬液1ml;HGF+G-CSF组,移植5×106/L携带HGF基因的MSCs细胞悬液1ml并且经腹腔注射G-SCF[100μg/(kg.

064/1.004;SER(Dq):1.079/1.047。流式细胞术:两细胞的凋亡率与照射剂量呈正比。在H2228组细胞中G0/G1期细胞阻滞现象明显,H3122细胞各周期细胞比率未见明显变化。Western Blot法:应用克唑替尼联合时STAT3的磷酸化过程受到阻滞。H2228细胞株阻滞现象更为明显。结论克唑替尼对NSCLC

H2228及H3122细胞株均有放射增敏作用,对H2228细胞株的放射增敏效果更加明显。
棘皮动物微管结合蛋白-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm 还有 microtubule-associated prote i n-l ike4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)在肺癌中已成为第二个最重要的驱动致癌基因,在4%~6%的肺腺癌中EML4-ALK已经成为第一个可以靶向治疗的融合基因位点。伴随着ALK分离探针荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)试剂盒的上市,克唑替尼已经被批准治疗ALK阳性的进展期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。然而,一种靶向药物的成功主要取决于一种敏感且特异的筛选实验方法来检测分子药物作用的靶点。以作者的经验看,用RTPCR来检测EML4-ALK,比用FISH和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)方法更敏感,结果更可靠。尽管通过FISH检测ALK已经经过大量的临床实验验证,然而该方法在技术层面仍存在许多具有挑战性的问题,而通过IHC和RT-PCR方法检测ALK仍需要临床进一步的探索。
随着肿瘤生物学、基因组学和分子生物学的发展,靶向治疗的研究和临床应用已成为当前肺癌领域的热点。本文对国内外有关非小细胞肺癌分子靶向治疗的靶点和主要药物进行了综述。首先概括了表皮生长因子受体抑制剂,其次总结了肿瘤血管生成抑制剂,包括抗血管内皮生长因子单克隆抗体、血管内皮抑素和金属蛋白酶抑制剂的研究,最后对新的靶点EML4-ALK抑制剂的研发进行了跟踪。未来肺癌靶向治疗药物的开发和临床应用会达到更加成熟的阶段。
间变性淋巴瘤激酶(anaplastic

DNA Synthesis inhibitor lymphoma kinase,ALK)融合基因是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的驱动基因,存在此基因表达的ALK阳性NSCLC已被认为是NSCLC的一种分子亚型,具有较独特的临床病理特征和预后,更为重要的是,ALK抑制剂对于此类晚期患者具有明显的疗效。因此,如何诊断此类患者便成为了病理诊断工作中相当重要的部分。目前ALK阳性NSCLC的诊断方法较为多样且各有优缺点,如何挑选最佳方法用于肺癌样本的常规诊断成为临床病理所关注的重点。国内外已有较多权威指南或共识推荐了诊断方法及其流程或相关标准。基于此,本文对ALK阳性NSCLC的诊断方法及特殊检测样本类型做一综述。
肺癌是全球发病率和致死率最高的疾病之一。非小细胞肺癌(non-small

无 cell lung cancer,NSCLC)是肺癌最为常见的组织学类型。近些年,分子生物学的发展让我们对NSCLC的认识从组织水平深入到分子水平。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变和间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因是NSCLC患者最为重要的两个肿瘤驱动基因。针对它们的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)显著改善了带有这类分子特征的NSCLC患者的生存。不幸的是,目前几乎所有针对这两种突变的初始靶向治疗都会不可避免地出现耐药问题。有关EGFR-TKIs的耐药机制及其应对策略已经有很多文章进行阐述,而对于ALK TKIs治疗后出现耐药问题的机制和相应的治疗策略还未曾有过详细的综述。因此,本文针对一代ALK TKI(克唑替尼)治疗ALK融合基因阳性的NSCLC患者(ALK+NSCLC)后引起耐药问题的机制和有关后续治疗策略做一综述。
背景与目的继表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变之后,间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因重排的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)已经成为了肺癌的又一重要的临床分型。在临床上需要选择一种特异,灵敏并且价廉的方法准确快速地找到ALK阳性的NSCLC患者。为此本研究探讨增强免疫组化法(ventana-IHC,V-IHC)检测ALK重排的临床可行性。方法利用V-IHC检测172例NSCLC患者ALK重排,阳性患者以荧光原位杂交法(fluorescence in situ hybridization,FISH)验证。结果 172例NSCLC患者中有12例为ALK阳性,经过FISH验证,11例患者为阳性,符合率为91.