DCP和c-Met在肿瘤组织中的阳性表达率均显著高于其在癌旁非肿瘤组织中的表达率。在肿瘤组织中,51%(78/153)的病例DCP和c-Met表达同时为阳性,20.9%(32/153)的病例二者的表达同时为阴性。在非肿瘤组织中,7.2%(11/153)的病例DCP和c-Met表达同时为阳性,65.4%(100/153)的病例二者的表达同时为阴性。在整个组织标本中,58.2%(89Obeticholic Acid/153)的病例DCP和c-Met表达同时为阳性,19.6%(30/153)的病例二者的表达同时为阴性。χ2检验表明DCP和c-Met在HCC标本中的存在具有相关性。c-Met在肿瘤组织中的表达与术后HCC复发有关。c-Met结合DCP比c-Met单独对预测术后HCC复发的意义更显著。c-Met和DCP在HCC标本中的表达均为阴性时,该组病人术后复发率低CP-868596制造商于c-Met或DCP表达为阴性的各组患者的复发率。 结论：c-Met和DCP在HCC组织中的表达具有广泛性和一致性,与HCC术后高复发率有关。当二者表达均为阴性时,HCC患者术后复发率较低。 第二章c-Met抑制剂抗HCC效果及机制研究 目的：探讨c-Met激酶小分子抑制剂SU11274对HCC细胞增殖的抑制作用。方法：选用高分化型HCC细胞株HepG2ERK抑制剂和HuH-7及低分化型HCC细胞株HLE, MTT法分别测定：①DCP对三种细胞增殖的刺激作用；②c-Met激酶抑制剂SU11274对三种细胞增殖的抑制作用；③同时加入DCP和SU11274对三种细胞增殖的影响。Western blot法测定SU11274对HepG2、HuH-7和HLE细胞c-Met、磷酸化c-Met和磷酸化ERK水平的影响。 结果：c-Met激酶特异性小分子抑制剂SU11274具有抑制HCC细胞生长增殖的活性。

结果:(1)不同浓度s CD40L对THP-1细胞作用24h、48h、72h小时后均有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,均有显著差异(p
目的对比55例结直肠癌组织和正常粘膜上皮组织中p55PIK表达的差异,探讨p55PIK是否与结直肠癌的发生发展有关,并进一步研究其与结直肠癌细胞迁移能力的相关性。 方法收集55例结直肠癌和对应患者的正常粘膜上皮组查看更多织临床标本,用Real-time PCR和免疫组化方法检测肿瘤组织和正常组织p55PIK mRNA水平和蛋白水平表达的差异,分析其表达水平与结直肠癌的发生发展的相关性。构建pFlag-CMV4- p55PIK表达质粒,细胞划痕实验观察高表达p55PIK后的结肠癌细胞株sw480细胞迁移能力的变化。 结果Real-time PC哪里R结果示55例标本中有35例肿瘤组织中p55PIK的表达较正常组织升高(63.6%),9例表达降低(16.4%),11例表达无明显变化(20.0%),免疫组化结果与Real-time PCR结果一致。表达质粒pFlag-CMV4- p55PIK构建成功后,高表达p55PIK的SW480细胞迁移能力有显著升高(从33%上升到70而且%,P
恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一。蛋白激酶B (PKB/Akt)为磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)的下游靶点,在肿瘤细胞凋亡信号通路的调节中起到十分重要的作用。研究证明,通过抑制PKB/Akt的活性,能有效地抑制肿瘤细胞增殖,遏制肿瘤的生长。目前已有多个PKB的小分子抑制剂进入临床研究。因此,研发新型的PKB/Akt抑制剂具有重大的意义。

此外,设置了键合紫杉醇胶束与紫杉醇纯药分组的比较,检测基于EPR效应的紫杉醇键合胶束对肿瘤组织的被动靶向效应。双亲性嵌段共聚物构建的纳米胶束因其优异的理化特性与机械强度,对活性药物的保护作用,低毒性,良好的生物相容性与可降解等特点,长春应化所实验室自主合成了多种聚合物胶束载体。为解决药物突释作用,载药聚合物在侧链键合活性药物分子后,通过自组装作用,将活性药物分子包裹而保护在已经壳-核结构的内部,从而减少了药物因为弥散作用而丢失。载药聚合物胶束有良好的水溶性,因而可以血管注射用药,增加了生物利用度。在肿瘤组织,载药聚合物通过配体-受体用介导的胞吞作用进入细胞内,继而在胞内的酸性环境下,触发释放活性药物分子而达到抑瘤作用。 叶酸作为主动靶向基元,具有其他配体更大的优势作用：包括(1)与一般蛋白类配体不同,叶酸无免疫原性；不引PR 171起过敏反应；(2)叶酸受体在大约90%非粘膜源卵巢癌细胞表面表达。在上皮组织来源的肿瘤细胞表面过表达,包括肾脏,脑,肺,乳腺等。叶酸受体的表达与肿瘤分型相关。基于叶酸-叶酸受体的特异结合,载叶酸的药物在叶酸受体过表达的肿瘤组织细胞呈靶向蓄积效应；(3)因为叶酸分子小,结构简单,对药物动力学影响极小；(4)以叶酸为靶向基元合成药物的成本较低,合成与纯Ribociclib化较简单；(5)叶酸的羧基易与羟基和氨基反应,其反应产物保持内在活性。基于这些优势,叶酸已应用于多种药物修饰,包括脂质体,聚合物,等。近来,叶酸通过羧基与氨基的反应与三嵌段共聚物键合,理论上可以增强细胞对药物的摄取而在体内叶酸键合胶束在荷瘤部位靶向浓积。 在本研究中,叶酸被选择为靶向基元,通过酯键结合在侧链上,构建功能性聚合物胶束。紫杉醇键合在另一聚合物载体上。两种聚合物制备为混合胶束,自组装形成载药的壳-核结构复合纳米微粒。

HDACs主要通过催化组蛋白底物和非组蛋白底物的去乙酰化反应调控基因表达、影响蛋白质的稳定性和结合作用等。 HDACs各亚型在许多种癌症中过度表达及其在癌细胞的周期、分化、凋亡、侵袭和转移和血管生成过程中发挥的重要作用,证明HDACs与癌症的发生发展密切相关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors, HDACi)能EPZ-6438体内够有效地抑制癌细胞的增殖,诱导癌细胞分化和凋亡。现有Vorinostat和Romidepsin被FDA批准上市用于治疗皮肤T-细胞淋巴瘤和总计22个HDACi进入临床抗癌研究阶段,因此近年来HDACi已成为抗癌新药研发的热点。 根据已有HDACs的晶体结构和HDACi的化学结构得出HDACi的药效团模型：Zn。+螯合基团和酶表面识别区时间域通过连接区域相连接。根据Zn2+螯合基团可将HDACi分为异羟肟酸类、2-氨基苯胺甲酰类、酰胺类、亲电子酮类、硫醇类、αα-巯基酮类、硫脲类、三硫代碳酸酯类和硼酸类等。 本课题通过对新近报道的HDAC2的X射线晶体结构进行分析,结合文献报道的对HDACsⅠ和Ⅱ亚族和胰腺癌细胞增殖的抑制活性较好的异噁唑类HDACi,通过生物电子等排原通常理,以2-氨基-1,3,4-噻二唑结构代替异噁唑结构设计了一系列新型化合物。在目标化合物的合成过程中,我们对2-氨基-1,3,4-噻二唑衍生物的合成方法进行了认真分析研究,选用氨基硫脲与苯甲酸、苯乙酸或3-苯丙酸等羧酸以三氯氧磷为脱水剂进行反应,集酰卤生成、酰胺缩合和成环反应于一锅法反应,简化操作,提高产率。上述反应得到的不同取代的2-氨基-1,3,4-噻二唑结构与各种长度的脂肪二酸发生缩合,最后转化成异羟肟酸。

实验中组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA处理PCCL3/BRAF和BCPAP细胞作为组蛋白乙酰化水平改变的阳性对照。大鼠钠碘同向转运体NIS启动子区域划分为7段区域：EXON(-20/104)， P1(-297/-107)，P2(-477/-277)，P3(-678/-452)，P4(-1124/-950)，P5(-1874/-1713)，NUE(-2627不/-2342)。人钠碘同向转运体NIS启动子区域划分为5段区域EXON(42/399)， P1(-692/-370)，P2(-1147/-762)，P3(-1511/-1216)，NUE (-9525/-9287)。运用染色质蛋白免疫共沉淀CHIP技术检测大鼠钠碘同向转运体NIS启动子区域组蛋白不同乙酰化位点乙酰化水平的改变。 不结果显示BRAFV600E突变体在PCCL3/BRAF细胞和PCCL3细胞表达时，大鼠钠碘同向转运体NIS基因mRNA表达水平在48h降低了50%到60%。细胞总体组蛋白乙酰化水平略有增加。染色质蛋白免疫共沉淀CHIP结果显示大鼠钠碘同向转运体NIS启动子区域：PCCL3/BRAF细胞诱导表达BRAFV600E突变时，组蛋白H3更多K9/14乙酰化位点在P1，P2和P3区域乙酰化水平降低，然而PCCL3细胞瞬时转染BRAFV600E突变时外显子EXON和P1区域H3K9/14乙酰化水平降低。在PCCL3/BRAF细胞中SAHA可以提高大鼠NIS启动子P1, P3，P4和NUE区域H3K9/14乙酰化水平。在PCCL3/BRAF和PCCL3细胞中，BRAFV600E突变仅影响H3K18和总H4大鼠NIS启动子P1和P2区域乙酰化水平。

结果:芝麻素能降低SHR舒张压,明显改善肾组织的病理学变化,降低肾脏BUN、SCr、U-m Alb、MDA含量及细胞凋亡率,提高SOD活性,显著减少p-AKT、p-m TOR、4EBP1、S6K1和Bax的蛋白水平,增加Bcl-2的蛋白表达。结论:芝麻素减轻SHR大鼠肾脏损伤的作用机制可能与降低血压、对抗氧化应激、抑制细胞凋亡、阻滞过度活化的PI3K/AKT这个/m TOR信号通路有关。
Aurora激酶的三种亚型Aurora-A、Aurora-B、Aurora-C是细胞有丝分裂的重要调节因子,近年来成为癌症治疗的热门靶点。本文重点介绍Aurora激酶三种亚型与肿瘤的关系,以及Aurora激酶抑制剂的最新研究进展和研究方向。
目的 :探讨AURKA基因表达下调对骨肉瘤细胞增殖和细胞周期selleck产品分布的影响。方法:脂质体瞬时转染法介导AURKA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)处理骨肉瘤U2-OS细胞,采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测转染前后AURKA mRNA和蛋白表达,CCK8实验检测细胞活力变化,流式细胞术检测细胞周期分布变化,Western blot检测周期trans-isomer solubility dmso相关蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)细胞增殖实验检测细胞增殖情况。结果:AURKA siRNA作用U2-OS细胞后,AURKA mRNA和蛋白的表达水平较正常对照组及阴性对照组显著降低,且差异有统计学意义(P
目的 Aurora-A在消化道肿瘤组织中存在过表达,本研究通过Meta分析的方法综合评价Aurora-A基因过表达与消化道肿瘤患者临床病理特征的相关性,为消化道肿瘤的诊断和治疗寻求新的靶点。

在出血、血栓等并发症方面:PV患者(P=0.005)及ET患者(P=0.004)有较高的发生率,而PMF患者无明显差异。在骨髓纤维化、向白血病转化(转白)等转归方面:PV患者(P=0.048)及ET患者(P=0.042)有较高的发生率,而PMF患者无明显差异。 4、JAK2V617F基因突变阳性的经典BCR/ABL阴性MPN患者与突变阴性患者http://www.selleckchem.cn/products/Bortezomib.html相比,在临床特征方面:PV患者有较高的白细胞计数(P=0.031);ET患者有较高的白细胞计数(P=0.032)、血红蛋白水平(P=0.044);PMF患者有较高的白细胞计数(P=0.000)。在出血、血栓等并发症方面:ET组中JAK2V617F基因突变阳性患者的发生率更高(P=0.002),PV及PMF组中差异无统GSK126计学意义。在骨髓纤维化、向白血病转化(转白)等转归方面:ET组中JAK2V617F突变阳性患者的发生率更高(P=0.024),PV及PMF组中差异无统计学意义。 结论:1、应用AS-PCR法能有效检测JAK2V617F基因突变的发生,可在临床上推广使用。 2、JAK2V617F基因突变对PV、ET患者有重要的临床鉴别无诊断价值。 3、经典BCR/ABL阴性MPN患者与相应的继发性因素引起的疾病在某些临床特征上有较明显的差异。 4、JAK2V617F基因突变阳性的经典BCR/ABL阴性MPN患者与突变阴性患者在某些临床特征上有较明显的差异。 5、PV患者与继发性红细胞增多症患者相比,ET患者与继发性血小板增多症患者相比,JAK2V617F基因突变阳性的ET患者与突变阴性的ET患者相比,前者的临床过程更具有侵袭性。

方法建立紫薯素干预~(60)Coγ辐射小鼠胸腺细胞的模型。应用MTT,首先检测~(60)Coγ辐射在0～12h范围内对小鼠胸腺细胞活力的影响,~(60)Co分为0,2,4,6Gy四个不同剂量进行单次辐射。不同剂量的紫薯素预处理细胞,MTT检测紫薯素对辐射细胞活力的影响、抗辐射的有效剂量以及其有无毒性反应。紫薯素对辐射细胞的作用检测可能中,通过DNA ladder检测细胞晚期凋亡;以流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色检测细胞早期凋亡;流式细胞仪PI染色检测细胞周期。 探讨紫薯素辐射防护作用的机制。测定紫薯素对氧化应激的影响:2,7-二氯氢化荧光素二酯(DCFH-DA)为荧光探针,检测紫薯素对~(60)Co照射后细胞内活性氧获悉更多(ROS)的影响;酶生化法测定抗氧化酶过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧物酶(GSH-px)的活力。研究紫薯素对~(60)Co诱导小鼠胸腺细胞凋亡的线粒体通路的影响:JC-1荧光染色测定线粒体膜电位;western-blot检测细胞色素C、caspase3和PARP的蛋白表达以及Bcl-2和Bax的蛋哪里白表达;对caspase 3和caspase 9进行酶活性检测。研究紫薯素对~(60)Co诱导小鼠胸腺细胞凋亡的死亡受体通路的影响:RT-PCR检测Fas mRNA;western-blot测定FADD的蛋白表达;caspase8酶活性的检测。检测紫薯素对~(60)Co诱导小鼠胸腺细胞的MAPK途径的影响:western-blot测定磷酸化的ERK、JNK、p38MAPK的蛋白表达。

激酶筛选发现，化合物5s可抑制NF-κB信号通路中关键的IKK激酶。有意思的是，深入的机制研究发现，化合物5s的两种异构体分别作用于p53-MDM2和NF-κB通路，并且具有较好的体内抗肿瘤协同作用，这一思路也为今后手性药物研究提供了一个新思路。 三、基于结构的虚拟筛选和先导核心骨架相似性搜寻策略的新型Keap1-Nrf2小分子抑制剂的发现及活性研究 通过基于结构的虚拟筛选技术从SpSirtuin抑制剂ecs商业数据库中筛选得到65个化合物，9个化合物具有Keap1-Nrf2蛋白相互作用抑制活性，其中化合物S47活性最强，达到2.9μM，与阳性对照相当。以活性较好的三类化合物为先导，基于先导核心骨架的相似性搜寻(HBSS)为策略，发现了多个高活性衍生物并探讨了它们的构效关系。细胞活性研究发现，具有较好蛋白抑制活性的11个化合物均表现出优异的细胞保护活性，远Dabrafenib 价格优于阳性对照。机制研究进一步证实化合物S47能在细胞内抑制Keap1-Nrf2的结合，解离Nrf2，并入核诱导下游靶基因的表达。
目的： 慢性粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia，CML）是一种起源于造血干细胞的克隆性骨髓增殖性肿瘤，90%以上患者可检测到特征性的Ph染色体及其分子标志bcr/abl融合基因，Ph染色体是由点击此处位于9q34的abl原癌基因断裂并易位到22q11的断裂点集簇区bcr融合形成[1]。随着分子靶向治疗药物的广泛使用，bcr/abl融合基因的突变是导致治疗效果不佳的主要原因之一，且在疾病整个治疗与预后中起着重要的作用。研究发现，T315I基因突变是目前治疗CML耐药最难以克服的基因突变[2]，国外报道bcr/ablT315I突变在CML患者中的发生率约占15%左右[3]。 鉴于目前国内关于bcr/ablT315I突变的研究鲜见报道。

本文的结果为研究肿瘤转移机制以及探索抑瘤转移方法提供了参考。
目的：支气管哮喘是由多种细胞参与的慢性气道炎症性疾病。研究表明,过敏性哮喘受辅助性T细胞的调节,而干扰素调节因子4在辅助性T细胞的分化中起着很重要的作用。因此,本研究探讨干扰素调节因子4是否在过敏性哮喘病人的全身免疫反应中起着一定的作用。方法：分别收集29个过敏性哮喘患者(过Reverse Transcriptase抑制剂敏性哮喘组)和12个健康志愿者(正常对照组)的外周血15ml,采用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞。用实时定量逆转录PCR法和western blot法检测外周血单个核细胞中干扰素调节因子4的基因和蛋白表达含量。用流式细胞仪检测外周血单个核细胞中辅助性T细胞1、辅助性T细胞2和辅助性T细胞17的比例。用ELI很少SA法检测血浆和细胞培养上清中的辅助性T细胞1、辅助性T细胞2和辅助性T细胞17的代表性因子干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)和白介素17(IL-17)的含量。用实时定量逆转录PCR法检测分别控制辅助性T细胞2、辅助性T细胞17和调节性T细胞分化的转录因子GATA3γt和FOXP3。结果：干扰素调节因子Selleckchem JQ14在过敏性哮喘组中的表达较正常对照组明显增多。辅助性T细胞2和辅助性T细胞17及它们的代表性因子IL-4和IL-17在过敏性哮喘组中的数量较正常对照组明显增多。辅助性T细胞1及其代表性因子IFN-γ生过敏性哮喘组和正常对照组中的表达没有明显变化。过敏性哮喘组干扰素调节因子4的表达分别与辅助性T细胞2、辅助性T细胞17和调节性T细胞的关键性转录因子GATA3、RORγt和FOXP3呈正相关。