目的通过网络药理学筛选西黄丸作用靶点,并探索西黄丸促肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用机制。方法1.应用网络药理学分析相关平台及方法筛选出西黄丸的活性成分和作用靶点,筛选出潜在的信号通路及靶点。2.以肝癌SMMC-7721细胞为研究对象,采用细胞增殖-毒性(CCK-8)检测不同浓度的西黄丸对肝癌细胞系抑制率的影响。3.采用caspase-3的荧光探针和许多TUNEL检测西黄丸对肝癌SMMC-7721细胞促凋亡作用。4.采用蛋白质免疫印迹(Western-Blot)法,验证西黄丸对肝癌SMMC-7721细胞caspase-3、GSDME、cleave-GSDME、NF-κB、NLRP3、TNF-α蛋白表达的调节作用。结果1.从西黄丸中共获得27个生物活性成分,通过筛选交集得到21个西黄丸通常与细胞焦亡的共同靶点,出现频次较高的有CASP3、RELA、VEGFA、BCL2、CASP9、CASP8、EGFR、IL6等,这些靶点主要参与凋亡信号通路的调节、半胱氨酸型肽链内切酶活性参与凋亡过程、死亡受体结合等生物过程,并主要富集在细胞凋亡、NF-κB信号通路、TNF信号通路等信号通路。2.细胞增殖-毒性(CCK-8)检测结果提示购买SIS3西黄丸对肝癌SMMC-7221细胞的抑制作用呈浓度及时间依赖性,西黄丸萃取液的IC_(50)为250μg/ml。3.细胞凋亡检测结果提示与空白对照组比较,西黄丸组caspase-3的荧光强度较高(P<0.05)。光学显微镜下观,西黄丸组的SMMC-7221细胞出现经典细胞凋亡空泡现象。荧光显微镜下观,西黄丸组的SMMC-7221细胞出现细胞核边缘不清晰,形态不规则,着色较深,呈深蓝色,并伴有细胞核固缩和凋亡小体。

目的探讨分析肝细胞生长因子(HGF)/酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。采用SP免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织标本HGF、c-met、β连环素(β-cateninEmricasan NMR)蛋白表达和mRNA表达情况。结果 HGF[82.67%(62/75)比48.33%(29/60)比14.00%(7/50)]、c-met[86.67%(65/75)比55.00%(33/60)比20.00%(10/50)]、β-catenin[78.67%(59/75)比41.67%(25/60)比6.00%(3/50)]在乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织https://www.selleck.cn/products/pf-573228.html以及癌旁正常乳腺组织中的表达均差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中HGF、c-met mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中乳腺癌相对表达量最高、乳腺纤维腺瘤相对表达量次之;而乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中β-catenin mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。HCBL0137购买GF表达阳性率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小、ER表达、HER-2表达有关(P<0.05)。c-met蛋白表达阳性率与病人肿瘤TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin蛋白表达异常率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HGF、c-met蛋白高表达而β-catenin蛋白异常表达,且HGF/c-met信号通路及β-catenin蛋白与乳腺癌侵袭转移密切相关。

使用TET1 sh RNA和TET1过表达质粒在胃癌细胞系中敲低和过表达TET1,后续使用CCK-8,划痕实验和transwell实验来观察TET1对胃癌细胞生物学行为的影响。使用实时定量PCR(q PCR)检测了TET1相关靶基因的表达量,并对这些潜在的靶基因的启动子区域使用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)来检测甲基化的程度。后续我们使用Glu MS-PCR检测了相关基因启动子区selleck合成域的5-hm C的含量。在本研究中,我们还使用了Western blot检测了TET1敲低和过表达后AKT和FAK通路的活化状态,以明确TET1对胃癌细胞的影响是通过何种途径发挥作用的。在实验的最后,我们使用裸鼠皮下成瘤和腹膜转移模型来说明TET1敲低后在体内实验中增加了胃癌细胞的增殖和转移。结果(1)我们发现相对于癌旁组组织,TET1的表达在胃癌组织中BKM120分子量明显降低(Wilcoxon检验p=0.036),同时基因组的羟甲基化的水平在肿瘤组织中也明显下降;(2)Kaplan-meier分析显示TET1高表达的胃癌患者的生存要优于TET1低表达的患者(p<0.01)。(3)在胃癌细胞系NCI-N87中敲低TET1可以通过CCK-8实验明显地观察到胃癌细胞的增殖(p<0.05),同时迁移和侵袭能力也增强(p<0.PF-02341066价格01)。而在SGC7901中过表达TET1可以明显抑制胃癌细胞增殖(p<0.05)和转移能力(p<0.01);(4)TET1可以引起经典的胃癌相关基因如PTEN启动子区域羟甲基化和甲基化的改变,TET1在NCI-N87中敲低后,PTEN启动子区域甲基化从1.5%升高到12%,而TET1在SGC7901中过表达之后,PTEN启动子区域甲基化从3%下降到0.9%。通过Ch IP我们证明了TET1可以结合至PTEN的启动子区域对其进行调控。

病理诊断及免疫组化结果2例B细胞表型(20%),8例为T细胞表型(80%),2例分型不详。慢粒的治疗及疗效12例患者中均接受过治疗,其中1例获得部分细胞遗传学反应(PCyR),3例完全细胞遗传学反应(CCyR),2例获得完全血液学缓解(CHR),1例获得主要分子生物学反应(MMR),1例化疗无效,其中1例患者获得极小细胞遗传学反应。非霍奇金CP-868596小鼠淋巴瘤的治疗及疗效12例患者中均接受过治疗,治疗后评估治疗疗效PR(5例),SD(1例),PD(5例),1例疗效不祥。12例患者的随访时间为2-110个月,平均为17.33个月。最终结局有4例死亡,死亡时间距离确诊分别为4、6、8、5月,平均为5.75个月。2.慢性粒细胞白血病继发非霍奇金淋巴瘤的患者本组共有患者共或20例,男性患者有15例(78.9%),女性患者4例(21.1%),1例性别不详;发病年龄在15-81岁,中位发病年龄为49岁。诊断慢粒时20例患者中有17例为慢性期,1例加速期,2例不详。慢性期中的患者中有3例患者分别在85、8、39个月时进入加速期,有1例患者在7个月时诊断慢性粒细胞白血病(急变期)。CML与NselleckHL诊断间隔时间为5-198个月,平均为56个月。淋巴结活检结果其中1例临床资料未查阅到非霍奇金淋巴瘤的表型,余下中有15例表现B细胞表型(78.9%),3例为T细胞表型(15.8%),1例为T/B混合表型(5.3%)。在19例患者中,17例患者的淋巴结中未检测出BCR-ABL融合基因,2例不详。慢粒的治疗及疗效这组患者共19例患者接受过治疗,1例因患者基础年龄大、基本情况较差未治疗最后死亡。

方法选取医院收治的136例(138枚)浅表转移性淋巴结及淋巴瘤(除甲状腺癌外)患者,依据病理结果将其分为淋巴瘤组(39例,40枚)和转移组(97例,98枚),所有患者均在放化疗前经超声诊断并采集声像图,分析其临床和声像图特点,包括是否合并临床症状和(或)体征、淋巴结大小、形状、边缘、淋巴结门回声、皮质回声、内部回声、有无钙化及血流模式。结果淋巴瘤组Liver X Receptor抑制剂出现临床症状和(或)体征、可触及肿块及发热的比例高于转移组,差异有统计学意义(x~2=18.816,x~2=8.166,x~2=4.957;P<0.05);淋巴瘤组较转移组的淋巴结长径更大,差异有统计学意义(t=1.678,P<0.05)。两组形态不规则、淋巴结门样血流、周边血流、网格样改变及部分极低回声或条索样改变以及回更多声不均匀比较,差异均有统计学意义(x~2=15.971,x~2=8.530,x~2=10.344,x~2=43.488,x~2=32.137;P<0.05)。在纳入的可疑超声征象中,网格样改变、部分极低回声或条索样改变较好的提示为淋巴瘤;而回声不均匀、形态不规则提示为转移性淋巴结。结论淋巴瘤的声像图特点与转移性淋巴结存在差分子量异,常规超声对鉴别浅表转移性淋巴结及淋巴瘤有一定临床意义。
目的探讨初治霍奇金淋巴瘤患者临床病理特征及预后影响因素。方法选择2013年1月—2018年12月收治的56例初治霍奇金淋巴瘤(HL)患者作为研究对象,分析其临床病理特征,所有患者随访截止至2019年12月,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,统计总生存期(OS),采用Log-rank检验及多因素COX逐步回归模型分析预后影响因素。

2.USP39参与卵巢癌细胞的剪接调控免疫共沉淀拉下与USP39相互作用的蛋白质并进行质谱检测,结果发现与USP39结合的蛋白大多是RNA结合蛋白和剪接相关蛋白。免疫荧光检测USP39在细胞中的定位,结果发现USP39与核散斑的标志物SC35存在共定位。核散斑是剪接因子聚集和组装的场所,提示USP39可能参与剪接调控。磷酸化的SF3B1是催化活性剪接体的标志物。Western CopanlisibBlot结果表明,过表达USP39后磷酸化的SF3B1水平升高;相反,敲低USP39后磷酸化的SF3B1水平降低。剪接报告基因的荧光素酶试验结果同样表明,敲低USP39后剪接效率降低。RNA-seq结果表明,USP39调控多个可变剪接事件,其中数量最多的是外显子跳跃。USP39敲低后,内含子含量升高,全基因组5’剪接效率和3’剪接效率均降低。RIP-sSelleck Ulixertinibeq检测与USP39蛋白结合的RNA序列,reads分析和peak分析发现,USP39结合最多的是内含子区域,且主要分布在内含子-外显子及外显子-内含子连接处。RIP-seq识别出分布在161个基因上的368个USP39结合峰,对与USP39结合的161个基因进行GO分析,结果显示转录共激活因子占比最多。综合RNA-seq和RIP-seq结果,将USPselleck Metabolism 抑制剂39敲低后基因表达水平降低、USP39敲低后剪接效率降低和USP39结合的基因这三者取交集,共筛选出11个USP39的候选靶基因,半定量PCR验证USP39对其中4个候选靶基因的调控作用并将HMGA2作为进一步研究的下游基因。3.USP39促进HMGA2的有效剪接并上调其表达RNA-seq结果表明,USP39敲低后,HMGA2的1 1条转录本表达均降低。剪接效率分析发现,USP39敲低后,HMGA2的5’剪接效率和3’剪接效率均下降。

结果在1 000μmol/L布比卡因作用下,各药物组N2a细胞的存活率明显降低,同时线粒体膜电位显著下降,而细胞的凋亡率、胞内ROS水平和Caspase-3表达则显著升高;50、200μmol/L右美托咪定可抑制布比卡因引起的N2a细胞毒性,使细胞的存活率及线粒体膜电位均明显升高,同时降低细胞的凋亡率、胞内ROS水平和Ca更多spase-3表达,200μmol/L右美托咪定的变化较50μmol/L更为明显。结论右美托咪定可减轻布比卡因对N2a细胞的毒性作用,其可能是通过抑制ROS的生成、改变线粒体膜电位、降低Caspase-3的表达,从而抑制细胞的凋亡来实现的。
[目的]通过研究γ-L-谷氨酰-S-烯丙基-L-半INCB018424价格胱氨酸(GSAC)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)线粒体功能的影响,探讨GSAC对肝纤维化的抑制作用。[方法]利用微板法测定GSAC对培养24 h细胞线粒体代谢甲基噻唑基四唑(MTT)的影响,以罗丹明123作为染料,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。[结果]GSAC具有抑制HSC-T6线粒体代谢MT点击此处T的作用,IC50值为0.835 mg/ml;GSAC引起线粒体膜电位崩溃,所有GSAC处理组(0.2、0.4与0.8 mg/ml)罗丹明123荧光强度极显著高于对照组。[结论]GSAC可破坏HSC-T6细胞线粒体功能,提示其对肝纤维化具有抑制作用。
目的研究抗附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)抗体对人成熟精子常规指标及其凋亡情况的影响,从而探讨Eppin抗体对精子的损伤机制。

因此,t RF-03357作为候选目标用于后续实验。(2)q RT-PCR检测结果显示转染t RF-03357 inhibitor的SK-OV-3细胞中t RF-03357的表达量低于NC组,转染t RF-03357 mimics的HOSEPIC细胞中t RF-03357的表达量高于NC组,表明转染效果可靠。(3)CCK-8实验结果显示转染INCB018424供应商t RF-03357 inhibitor的SK-OV-3细胞的增殖能力低于NC组,转染t RF-03357 mimics的HOSEPIC细胞的增殖能力高于NC组,表明t RF-03357可以促进细胞增殖。(4)Transwell实验显示转染t RF-03357 inhibitor的SK-OV-3细胞的迁移和侵袭能力点击此处低于NC组,转染t RF-03357 mimics的HOSEPIC细胞的迁移和侵袭能力高于NC组。表明t RF-03357可以促进细胞迁移和侵袭。(5)TUNEL实验结果显示各组间细胞的凋亡差异不显著,表明t RF-03357不影响细胞的凋亡。第三部分t RF-03357通过调控HMBOX1促进卵巢癌的机制研究的结不要果(1)qRT-PCR检测结果显示,与NC组相比,转染t RF-03357 inhibitor后,SK-OV-3细胞中HMBOX1的表达水平显著提高,而PKN2,KLF3,PTPN13和ESR2的表达水平没有显著改变。q RT-PCR进一步研究发现,转染t RF-03357 mimics的SK-OV-3细胞中HMBOX1基因表达水平显著下调,说明t RF-03357下调HMBOX1基因的表达。

结论本研究首次证实了高浓度褪黑素作用于成骨细胞hFOB1.19可通过激活内质网应激相关的PERK通路引起caspase、CHOP和JNK的级联反应从而介导成骨细胞凋亡,POSTN和SEPTIN7在此过程中可能通过抑制PERK通路INCB018424分子量和内质网应激而起到保护性作用。
目的目前,肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均高居恶性肿瘤的榜首。全世界男性中,肺癌发病率和死亡率均占全部恶性肿瘤的第一位,而女性肺癌发病率占全部恶性HSP 抑制剂肿瘤的第二位,死亡率同样位于全部肿瘤的第二位。在我国,由于烟草的使用及环境因素的影响等,肺癌发病率呈显著上升趋势,我国已成为全世界肺癌大国之一;肺癌按组织学分类可分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中,非小selleckchem细胞肺癌是最常见的肺癌组织学类型之一,约占肺癌总数的80-85%,非小细胞肺癌可进一步分为鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌等。近些年来,无论是在我国还是全球其他国家,非小细胞肺癌的发病率亦呈逐渐增高的趋势,已成为致死率最高的恶性肿瘤类型之一。因此,探索非小细胞肺癌的有效治疗方法显得尤为重要。

因此,通过各种研究技术和手段深入研究胃癌发生、发展、转移以及耐药的分子机制,寻找早期诊断的分子标志物以及药物靶标已迫在眉睫。最近的研究表明,非编码RNAs参与了肿瘤转移和恶性转化的过程。MiR-4295是一个新发现的微小RNA(microRNA)分无子,通过生物信息学分析,我们发现miR-4295与lncRNA HOTAIR存在结合位点。因此,我们的研究就从非编码RNAs入手,研究微小RNA(miR-4295)和长链非编码RNA(lncRNA HOTAIR)在胃癌生长获悉更多增殖和侵袭迁移中的功能及其机制。第一部分miR-4295通过PTEN/PI3K/AKT通路调控胃癌生长和侵袭迁移的研究方法本研究采用qRT-PCR检测胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803、BGC-823、MKN-28Omipalisib购买和人胃粘膜上皮细胞系GES-1中及胃癌组织中miR-4295的表达情况。构建miR-4295真核质粒过表达载体及其抑制剂载体(miR-4295 inhibitor);采用瞬时转染法将构建好的载体转染至胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803中,qRT-PCR检测转染细胞系中miR-4295的表达。