2)TAK165协同ATRA诱导AML细胞分化。TAK165与ATRA联合作用于HL60和NB4细胞,通过血细胞计数板计数法,计数并描绘细胞生长曲线,结果表明TAK165可以明显促进ATRA引起的HL60和NB4细胞的增殖抑制作用。通过PI染色法检测细胞周期分布变化,TAK165可以协同ATRA使HL60和NB4细胞周期阻滞于G0/G1期。我们从分子标志、生化功能、形态学和细胞分无化相关基因和蛋白的表达情况几方面确证了TAK165可以增强ATRA引起HL60和NB4细胞分化的作用。ATRA单独作用于HL60和NB4细胞72小时,CD11b阳性率分别为24.8%±3.0%,而TAK165与ATRA联合应用时,CD11b阳性率达到80.0±3.4%。TAK165与ATRA联合作用时,NBT还原能力也较TAK165和ATRA单独作用时明此网站显增强,NBT阳性细胞比例由21.30%±2.45%到93.40%±1.19%。瑞氏-吉姆萨染色结果显示,TAK165与ATRA作用于HL60和NB4细胞,引起细胞胞体变小,细胞核固缩,核质比例下降,而且TAK165与ATRA合用引起的细胞形态学变化与单用组相比更为明显。此外,通过Realtime-PCR和Western blot检测细胞分化相关基因(CIpatasertibEBPB、CEBPE、PU.1),分化相关蛋白(C/EBPp、PU.1)的表达情况,发现TAK165与ATRA联合作用使分化相关基因上调,相关蛋白的表达增加,确证了TAK165可以协同ATRA诱导AML细胞分化。3)TAK165协同ATRA诱导AML细胞分化的机制研究。通过Western blot检测HL60和NB4细胞中HER2蛋白表达,结果显示与HER2高表达的乳腺癌BT474相比,在AML细胞中几乎检测不到HER2蛋白的表达。