6.2检测Src在TRIM7介导的对mTORC1-S6K1信号通路的抑制效应中的作用在过表达TRIM7的Huh7肝癌细胞中,外源性过表达Src,应用western blot验证Flag-TRIM7和HA-Src的表达水平,并检测p-Src(Tyr419)的水平和mTORC1-S6K1信号通路分子的磷酸化水平。在Hu更多h7肝癌细胞中,分别转染Si-NC、Si-TRM7-1或Si-TRM7-2,应用雷帕霉素(Rapamycin)抑制mTORCI信号通路的活性,应用western blot验证TRIM7的表达水平和mTORC1-S6K1信号通路分子的磷酸化水平,并检测Src和p-Src(Tyr419)的水平selleck激酶抑制剂。以此研究TRIM7对Src和mTORC1-S6K1信号通路调控效应的上下游关系,探讨Src在TRIM7介导的对mTORC1-S6K1信号通路的抑制效应中的作用。6.3检测TRIM7是否通过调控Src-mTORC1-S6K1信号轴发挥其抗肿瘤作用6.3.1检测TRIM7是否通过调控Src发Panobinostat挥其抗肿瘤作用在过表达TRIM7的HepG2和Huh7肝癌细胞中,外源性过表达Src,应用western blot 验证 Flag-TRIM7 和 HA-Src 的表达水平,应用 CCK-8、Transwell 和克隆形成实验分别检测HepG2和Huh7肝癌细胞的增殖、侵袭和克隆形成能力。应用靶点恢复实验研究TRIM7是否通过对Src的负向调控效应发挥其对肝癌的抑癌效应。