82±0.01和0.7±0.01,均高于non-pretreated组(0.52±0.01),差异均有统计学意义(P<0.01)。激光共聚焦显微镜检测线粒体内Cl-浓度显示,DIDS组和DIDS+SB203580组的Cl-浓度均低于non-pretreated组,差异有统计学意义(P<0.01),但均低于DIDS+SB203580组(P<0.01)。流式细胞术检测细胞凋亡率显示,LB处理后DIDS组、DIDS+SB203580组、SB203580组和non-pretreated组分别为23.4±1.58%、12.73±0.96%、24.53±0.93%和38.17±0.22%。Hoechst33258染色法检测显示,经LB处理后DIDS组、DIDS+SB203580组、SB203580组和Non-pretreated组的凋亡率分别为22.88±1.13%、12.45±0.74%、24.68±0.85%和37.8±0.99%。提示经LB处理后DIDS组.DIDS+SB203580组和SB203580组的凋亡率均低于non-pretreated组(P<0.01),DIDS+SB203580组的凋亡率低于SB203580组(P<0.01)。而鞘内注射LB组大鼠脊髓组织ROS水平均较未注射组水平显著升高(均有P<0.01)。而鞘内注射LB组大鼠脊髓背角浅层神经组织caspase-3阳性细胞数均较未注射组显著升高(均有P<0.01)。而鞘内注射LB组大鼠脊髓背角浅层caspase-9阳性细胞数均较未注射组显著升高(均有P<0.05)。而鞘内注射LB组大鼠脊髓p-p38MAPK蛋白表达水平均较未注射组显著升高(均有P<0.01)。而鞘内注射LB组大鼠脊髓背角浅层TUNEL阳性细胞数均较未注射组显著升高(均有P
第一部分双任务干预对携带LRRK2基因突变的帕金森病患者手灵活性的影响
一般 背景及目的：观察执行单任务和双任务时LRRK2-PD病人手灵活性变化及双任务干预情况。 方法：受试者总数为122例,帕金森病(PD)患者均来自“国家863”数据库,PD患者又按是否携带LRRK2基因突变分为两个亚组：LRRK2(+)PD(LRRK2基因突变携带PD患者)与非LRRK2(一)PD(非LRRK2基因突变携带PD患者)；由北京社区老年人数据库调取与PD患者年龄、性别匹配的健康人群作为对照,对照组按是否携带LRRK2基因突变分为两个亚组：LRRK2(+)对照组(LRRK2基因突变携带的健康受试者)和LRRK2(一)对照组(非LRRK2基因突变携带的健康受试者)。第一任务为普渡钉板测试,第二任务是连续减7,然后分别进行单任务、双任务测试,分别记录优势手、非优势手和双手30秒内插入的钉子数、正确的反应数。
这个 结果：LRRK2(+)PD组受试者UPDRSⅢ评分明显高于LRRK2(一)PD组受试者(P<0.05)。执行单一的钉板任务、双任务时,LRRK2(+)PD与非LRRK2(一)PD在30秒内放入的钉子数均较对照组都有显著下降(P<0.05)。LRRK2(+)PD正确反应数的变化大于LRRK2(-)PD,各项指标NVD、NVND、NVB有显著差异(P<0.05)。LRRK2(+)PD与LRRK2(一)PD患者在30秒内正确反应数的差异与UPDRSⅢ评分显著相关(p<0.05)；与对照组比较,受累手与非受累手钉板数变化无显著差异(P)0.05)。受累手执行双任务时,30秒内正确的反应数较对照组都有下降,差别有显著统计学意义(P<0.05)；不论受累手、非受累手执行双任务时,30秒内正确的反应率较对照组都有显著下降(P
为了揭示高效抗氧化剂MT(Metallothionein)对热应激泌乳牛淋巴细胞凋亡/坏死的调节机理,本论文首先以中国荷斯坦奶公犊脾淋巴细胞为体外培养对象,采用1h,43℃或正常培养,诱导细胞发生不同程度的凋亡和坏死,同时采用不同终浓度的MT处理,结合流式细胞术和western-blot支术,研究抗氧化剂MT和对细胞凋亡/坏死的影响及其相关信号通路的调节机理,初步了解抗氧化剂MT对热应激细胞的凋亡/坏死的影响及部分与凋亡信号通路相关的活性因子的调节机理；后以20头正处于热应激的中国荷斯坦泌乳牛为试验研究对象,依据不同MT剂量分成：A(0mg/头)、B(4mg/头)、C(8mg/头)和D(16mg/头)4组,静脉注射后采取时间递减法采血(第1次采血为注射MT之前),应用流式细胞术、western-blot和实时定量PCR技术,进行MT对奶牛热应激所致血淋巴细胞凋亡/坏死的影响及调节机理的研究,为生理活性物质和细胞凋亡的理论研究及其在生产优质安全奶产品中的应用提供科学依据和探索新的途径。主要研究结果如下：
购买2-Methoxyestradiol 1MT为5.25～8.25μg/mL时,对正常细胞凋亡有轻微上调作用；低浓度MT(2.25μg/mL)小幅度上调细胞坏死率；MT可提高细胞线粒体膜电位,其中热应激细胞所需MT浓度高(8.25μg/mL),而正常细胞需MT浓度宜适中(3.75～6.75μg/mL),其它浓度则不能充分保护细胞；热应激导致细胞的核转录因子活性亚基p50的磷酸化蛋白表达上调,但抑制活性亚基p65的磷酸化蛋白表达,对非热应激的原代脾淋巴细胞,MT可提高核转录因子亚基p65的活性,p65是细胞中发挥效用的亚基,因此热氧化应激导致NF-κB的活性下降,热应激信号不能很快转入细胞核内；MT具有上调phospho-P53的表达及其活性,调节热应激损伤所致细胞的凋亡,达到其保护作用：MT使用浓度为2.25μ.g/mL,因上调Phosphs-c-jun的表达量而提高AP-1的生成量,而热氧化应激时细胞Phospho-c-jun表达量低而抑制AP-1的生成量。因此,热处理提高牛脾淋巴细胞线粒体膜电位,但同时也导致细胞坏死率增加,而添加MT不仅提高细胞线粒体膜电压,还对热应激导致细胞坏死具有较好的抑制作用,MT保护细胞比热处理更具有现实的意义,同时也初步证明线粒体通路是MT调节细胞凋亡/坏死的信号转导通路之一 2注射MT后,在51～60d时,校正标准产奶量B、C和D组均显著性高于A组(P<0.05)；细胞的坏死率A组50d时较1d时显著下调(P<0.05)；60d时,细胞内NO含量较注射MT之前,极显著(P<0.01)增加,同时显著大于注射35d时(P<0.